納米抗菌復(fù)合膜對成骨樣細(xì)胞生長的影響.pdf

1、引導(dǎo)骨再生(Guided bone regeneration，GBR)技術(shù)己廣泛應(yīng)用于口腔種植修復(fù)領(lǐng)域，選擇良好的GBR膜是該技術(shù)成功的關(guān)鍵因素之一。本研究通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，探索載銀納米羥基磷灰石一二氧化鈦/聚酰胺66(Ag-nHA-nTiO<,2>/PA66)抗菌復(fù)合膜對成骨樣細(xì)胞增殖及黏附的影響，考察其生物安全性，為臨床實(shí)驗(yàn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 本研究以新近研制成功的國產(chǎn)Ag-nHA-nTiO<,2>/PA66生物膜為實(shí)驗(yàn)組，nH

2、A/PA66膜及膨體聚四氟乙烯膜(Expanded Polytetranuoroethylene， e-PTFE)為對照組，采用掃描電鏡和光學(xué)顯微鏡分別觀察三組膜的結(jié)構(gòu)，且在膜上接種MG63成骨樣細(xì)胞并設(shè)空白對照，MTT法檢測MG63成骨樣細(xì)胞的增殖曲線，CVA檢測細(xì)胞增殖活力，酶聯(lián)免疫法檢測細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase，ALP)的活力和細(xì)胞基質(zhì)鈣離子的含量。掃描電鏡(Electron microscope

3、，SEM)觀察細(xì)胞在膜上接種后的第一天和第五天的粘附及增殖情況。結(jié)果顯示，Ag-nHA-nTiO<,2>/PA66膜分為正面和反面，正面為大孔結(jié)構(gòu)，形態(tài)不規(guī)則，直徑50～300um，孔穴內(nèi)可見納米羥基磷灰石晶體沉積其中：而其反面比較光滑，結(jié)構(gòu)致密，有散在的小孔微結(jié)構(gòu)，形態(tài)一般為圓形，直徑約2-10um。nHA/PA66膜的結(jié)構(gòu)與Ag-nHA-nTiO<,2>/PA66膜的結(jié)構(gòu)基本一致。e-PTFE膜正反面結(jié)構(gòu)相同，由成行排列，大小不一的

4、長橢圓形的裂隙組成，長約15um，寬約3 5um。在光學(xué)顯微鏡下，Ag-nHA-nTiO<,2>/PA66復(fù)合生物膜的橫截面結(jié)構(gòu)正面的大孔隙相互聯(lián)通，構(gòu)成三維支架樣結(jié)構(gòu)，而反面則是較致密的結(jié)構(gòu)：nHA/PA66膜結(jié)構(gòu)與實(shí)驗(yàn)組大致相同；e-PTFE膜的橫截面結(jié)構(gòu)正反兩面的孔隙大小相當(dāng)，且相互交通。MTT檢測結(jié)果顯示，成骨樣細(xì)胞在Ag-nHA-nTiO<,2>/PA66膜、nHA/PA66膜和e-PTFE膜上的生長均有增殖趨勢，兩組問無統(tǒng)計

5、學(xué)差異(P>0.05)。CVA檢測的結(jié)果顯示，Ag-nHA-nTiO<,2>/PA66復(fù)合膜的細(xì)胞活力度與對照組有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)，實(shí)驗(yàn)組的活力度小于對照組，三組間的ALP活性和鈣離子含量無顯著性差異(P>0.05)。SEM觀察結(jié)果表明，細(xì)胞在三種膜上粘附及增殖情況良好，MG63成骨樣細(xì)胞在Ag-nHA-nTiO<,2>/PA66膜和nHA/PA66膜上的粘附效果則更好，其伸展更充分。 體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，Ag-n