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1、目的:了解連環(huán)蛋白p120(p120ctn)及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)在胰腺癌細(xì)胞株中的表達(dá)情況,篩選出p120ctn表達(dá)差異明顯的細(xì)胞株,探討p120ctn的表達(dá)與胰腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)系,為研究胰腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制及臨床干預(yù)策略提供理論依據(jù)。
方法:選取五種胰腺癌細(xì)胞株panc-1、BXPC-3、capan-1、Patu8988、CFPac-1及
2、胰腺星狀細(xì)胞(pancreatic stellate cell,PSCs)作為研究對(duì)象,分別抽提各細(xì)胞株的總RNA及總蛋白,將總RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcript polymerase chain reaction,RT-PCR)、Western blot等方法檢測(cè)五株胰腺癌細(xì)胞及PSCs中p120ctn及VEGF的表達(dá)情況;選取表達(dá)差異明顯的panc-1及Patu8988細(xì)胞株,利用T
3、ranswell小室及Matrigel膠進(jìn)行細(xì)胞侵襲遷移實(shí)驗(yàn)觀察其生物學(xué)行為。
結(jié)果:與PSCs相比,五種胰腺癌細(xì)胞株中p120ctn在mRNA及蛋白質(zhì)水平的表達(dá)均上調(diào),且在不同胰腺癌細(xì)胞株中表達(dá)存在差異。其中,以panc-1與Patu8988細(xì)胞株間差異最為明顯,panc-1細(xì)胞株中p120ctn的蛋白表達(dá)較Patu8988明顯為高,而VEGF的表達(dá)則明顯較低;侵襲遷移實(shí)驗(yàn)顯示,p120ctn低表達(dá)的Patu8988細(xì)胞
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