Hedgehog信號通路相關(guān)因子在TCA舌癌細(xì)胞株中的表達(dá)及其意義.pdf

1、目的：研究Hedgehog（Hh）信號通路相關(guān)因子在舌癌細(xì)胞株TCA中的表達(dá)，探討其對TCA細(xì)胞株增殖和遷移的影響。
　　方法：本研究用Hh信號通路抑制劑Cyclopamine處理TCA細(xì)胞后，采用MTT和劃痕實驗來檢測細(xì)胞抑制率和遷移能力，利用RT-PCR法和Western-Blot方法檢測Hh信號通路相關(guān)因子mRNA和蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：MTT結(jié)果顯示Cyclopamine對TCA細(xì)胞有抑制作用，且具有濃度依賴性。細(xì)胞

2、劃痕實驗結(jié)果顯示，在對照組中劃痕間距隨著時間的增加而減小，而Cyclopamine藥物組的愈合時間較長。加藥24h后RT-PCR結(jié)果顯示，Ptch基因在Cyclopamine藥物組中的表達(dá)低于對照組，20μM Cyclopamine和10μM Cyclopamine藥物組中表達(dá)明顯低于5μM Cyclopamine藥物組。Smo基因在藥物組中的表達(dá)低于對照組，且隨著藥物組濃度增高表達(dá)降低。加藥48h后結(jié)果顯示，Ptch基因在Cyclop

3、amine藥物組中的表達(dá)低于對照組。Smo基因在藥物組中的表達(dá)低于對照組，且隨著藥物組濃度增高表達(dá)降低。Gli1基因在對照組中的表達(dá)高于藥物組。加藥后72h結(jié)果Ptch基因在Cyclopamine藥物組中的表達(dá)低于對照組，在各藥物組間無明顯差異。
　　加Cyclopamine24h后Western Blot結(jié)果顯示，Ptch蛋白在藥物組中的表達(dá)低于對照組，隨著濃度的增高表達(dá)降低。Smo蛋白在藥物組中的表達(dá)低于對照組，10μM Cy

4、clopamine藥物組表達(dá)低于20μM Cyclopamine藥物組。48h結(jié)果顯示Ptch蛋白和Smo蛋白在Cyclopamine藥物組中的表達(dá)低于對照組，10μM Cyclopamine藥物組中的表達(dá)高于其他 Cyclopamine藥物組。72h結(jié)果顯示Smo蛋白在Cyclopamine藥物組中的表達(dá)低于對照組，隨著濃度增高蛋白表達(dá)降低。
　　結(jié)論：Hh信號通路特異性抑制劑Cyclopamine可以抑制TCA的生長，并可能降