Hedgehog信號(hào)通路Gli-1基因及EMT相關(guān)因子Slug在宮頸癌細(xì)胞中的表達(dá).pdf

1、有關(guān)宮頸癌是否存在 Hedgehog信號(hào)通路及 EMT(epithelial mesenchymal transition上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化)相關(guān)因子的異常表達(dá)以及對(duì)宮頸癌的發(fā)生，侵潤(rùn)及轉(zhuǎn)移的影響，目前相關(guān)報(bào)道甚少。本研究通過以不同濃度非甾體生物堿cyclopaine阻斷Hedgehog信號(hào)通路，觀察宮頸癌Hela細(xì)胞中Hedgehog信號(hào)通路關(guān)鍵因子Gli-1和EMT相關(guān)因子Slug表達(dá)受抑制后，宮頸癌細(xì)胞生物學(xué)行為的改變，探索其作為宮頸癌

2、Hedgehog-EMT信號(hào)通路治療新靶點(diǎn)的可能性。
　　目的：
　　宮頸癌Hela細(xì)胞中觀察Hedgehog信號(hào)傳導(dǎo)通路關(guān)鍵因子Gli-1及EMT相關(guān)因子Slug的表達(dá)，探索Hedgehog信號(hào)傳導(dǎo)通路和EMT相關(guān)因子對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。
　　方法：
　　1． MTT法和軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)宮頸癌Hela細(xì)胞的細(xì)胞體外增殖能力和細(xì)胞集落形成能力。
　　2． RT-PCR的方法檢測(cè)宮頸

3、癌Hela細(xì)胞中Gli-1和 Slug基因mRNA的表達(dá)。
　　3. Western-Blot方法檢測(cè)宮頸癌Hela細(xì)胞Gli-1和Slug蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1. MTT和軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著Hedgehog信號(hào)傳導(dǎo)通路抑制劑cyclopamine藥物濃度的增加，細(xì)胞增殖率及細(xì)胞集落的形成能力下降，具有顯著差異（p<0.05）。
　　2. RT-PCR結(jié)果顯示，不同濃度cyclopamin

4、e作用于宮頸癌Hela細(xì)胞24h和48h后，藥物組 Gli-1和 Slug基因表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組。在藥物組中5uM cyclopamine藥物組的Gli-1和Slug基因表達(dá)最明顯，10uM cyclopamine藥物組和20uM cyclopamine藥物組 Gli-1和 Slug基因表達(dá)逐漸下降。且隨著cyclopamine作用時(shí)間的延長(zhǎng)Gli-1和Slug基因表達(dá)逐漸下降。
　　3. Western-Blot結(jié)果顯示，c

5、yclopamine作用于宮頸癌Hela細(xì)胞24h和48h后，藥物組 Gli-1和 Slug蛋白表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組。在藥物組中5uM cyclopamine藥物組的蛋白表達(dá)最顯著，10uM cyclopamine藥物組和20uM cyclopamine藥物組蛋白表達(dá)逐漸下降。且隨著cyclopamine作用時(shí)間的延長(zhǎng)Gli-1和Slug蛋白表達(dá)逐漸下降。
　　結(jié)論：
　　1. Cyclopamine的應(yīng)用抑制了宮頸癌He