BCL11A在宮頸癌組織中的表達(dá)及其在宮頸癌細(xì)胞中的作用及影響.pdf

1、宮頸癌是一種女性常見(jiàn)腫瘤，對(duì)女性身心健康造成了極大危害，近年來(lái)其發(fā)病率及死亡率在全球范圍內(nèi)呈上升趨勢(shì)。雖然人類(lèi)在宮頸癌HPV疫苗的研發(fā)中已有重大突破，但是全球范圍內(nèi)，宮頸癌依然是第四大癌癥，其死亡率僅次于乳腺癌。B細(xì)胞淋巴瘤11A（B-cell CLL/lymphoma11A，BCL11A），其同源基因Evi9（ecotropic viral integration site9）最初發(fā)現(xiàn)于骨髓性白血病BXH2小鼠中，作為逆轉(zhuǎn)錄病毒的插入

2、位點(diǎn)，并與BCL6蛋白相互作用[1]。BCL11A在非實(shí)體瘤如白血病、淋巴瘤等造血與淋巴組織腫瘤中發(fā)揮重要作用[2,6]。最近有研究發(fā)現(xiàn)，BCL11A在實(shí)體瘤如三陰性乳腺癌及非小細(xì)胞肺癌中也發(fā)揮著重要作用[3,4]，但是BCL11A在宮頸癌中的作用尚未有報(bào)道，本研究將主要通過(guò)組織及細(xì)胞水平研究BCL11A在宮頸癌中的作用及對(duì)其機(jī)制進(jìn)行初步探索。
　　第一部分 BCL11A在宮頸癌組織中的表達(dá)及其臨床意義
　　目的：
　

3、　研究BCL11A在宮頸癌組織及癌旁正常組織中的表達(dá)情況，并分析其差異表達(dá)與臨床病理因素之間的關(guān)系及臨床意義。
　　方法：
　　結(jié)合TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)，利用生物信息學(xué)分析BCL11A在不同癌癥組織及相應(yīng)正常組織中的表達(dá)，并分析BCL11A的表達(dá)與宮頸癌患者預(yù)后的關(guān)系。收集62例宮頸癌組織及相對(duì)應(yīng)的癌旁正常組織，制作成石蠟切片，并通過(guò)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)BCL11A蛋白在宮頸癌組織和癌旁正常組織中的表達(dá)，并結(jié)合患者資料，分析 BCL

4、11A的表達(dá)與臨床病理因素之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：生物信息學(xué)分析得知BCL11A在宮頸癌及癌旁正常組織中存在差異；在收集的62例宮頸癌組織及癌旁正常組織中均檢測(cè)到了BCL11A的表達(dá)，其中有50例宮頸癌組織檢測(cè)到BCL11A的高表達(dá)（80.6%）；有13例癌旁正常組織中檢測(cè)到BCL11A的高表達(dá)（21%）。BCL11A蛋白在宮頸癌組織及癌旁正常組織中的表達(dá)存在差異（P＜0.01）；BCL11A蛋白的表達(dá)與宮頸癌患者的年齡（P=0.

5、436），腫瘤大小（P=0.734）以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目（P=0.439）等無(wú)關(guān)；與未出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（N0）的宮頸癌患者相比，在出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（N1-3）的宮頸癌患者中BCL11A蛋白的表達(dá)較高（P＜0.05）；BCL11A表達(dá)較高的宮頸癌患者的總生存期要優(yōu)于 BCL11A表達(dá)較低的宮頸癌患者。在宮頸癌組織中，BCL11A的表達(dá)主要定位于細(xì)胞核，在宮頸癌正常組織中,BCL11A的表達(dá)主要定位于細(xì)胞質(zhì)中。
　　結(jié)論：
　　BCL

6、11A在宮頸癌組織中高表達(dá)，在癌旁正常組織中表達(dá)較低；BCL11A的表達(dá)與宮頸癌患者的淋巴結(jié)受累情況相關(guān)，即出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者BCL11A的表達(dá)較高；在疾病發(fā)展的早期，BCL11A表達(dá)高的宮頸癌患者的總生存期要優(yōu)于BCL11A表達(dá)低的宮頸癌患者，但并不能作為獨(dú)立的宮頸癌患者總生存期的判定指標(biāo)；在宮頸癌組織中BCL11A的表達(dá)主要定位于在細(xì)胞核中，而在癌旁正常組織中，BCL11A的表達(dá)主要定位于細(xì)胞質(zhì)中。
　　第二部分干擾BCL1

7、1A基因的表達(dá)對(duì)宮頸癌細(xì)胞相關(guān)生物學(xué)特性的影響
　　目的：
　　研究BCL11A基因?qū)m頸癌細(xì)胞周期、凋亡以及增殖能力的影響
　　方法：設(shè)計(jì)并合成干擾BCL11A基因的si-RNA序列，篩選出干擾效果最佳序列；通過(guò)細(xì)胞轉(zhuǎn)染靶向沉默BCL11A基因在宮頸癌 C33A細(xì)胞中的表達(dá)，通過(guò)流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)沉默BCL11A后，C33A細(xì)胞周期及凋亡的變化情況；使用CCK-8試劑盒檢測(cè)C33A細(xì)胞增殖能力的變化。
　　結(jié)果：

8、
　　BCL11A在宮頸癌C33A細(xì)胞中表達(dá)較高，在Hela，Siha和CaSki細(xì)胞中表達(dá)較低；與siRNA2和siRNA3相比，siRNA1的干擾效率最好；與blank control組（6.56±0.59%）和NC組（7.85±0.47%）相比，siRNA-BCL11A組（28.45±4.07%）的細(xì)胞凋亡比率明顯升高，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但是三組的細(xì)胞周期變化及增殖能力無(wú)明顯差異。
　　結(jié)論：