MIF在不同宮頸癌細(xì)胞株中的表達(dá)及對(duì)宮頸癌細(xì)胞株增殖的影響.pdf

1、宮頸癌，是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，發(fā)病率位于女性腫瘤的第二位。山西省是國(guó)內(nèi)外罕見(jiàn)的宮頸癌高發(fā)區(qū)，且發(fā)病人群有年輕化趨勢(shì)，因此宮頸癌是嚴(yán)重威脅我省婦女健康的疾病之一。腫瘤的主要特征是惡性細(xì)胞的持續(xù)性增殖。本課題組前期對(duì)早期宮頸鱗癌(SCC)進(jìn)行了cDNA基因芯片篩查，發(fā)現(xiàn)MIF在早期宮頸鱗癌有淋巴轉(zhuǎn)移組織中表達(dá)上調(diào)，提示MIF可能促進(jìn)宮頸癌的發(fā)生發(fā)展。
　　 目的：研究MIF、CD74、PI3K、cyclinD1、Ki67在人宮頸癌

2、細(xì)胞株C33A、Siha、Caski中的表達(dá)，探索MIF與CD74在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的作用，探索MIF和PI3K、cyclinD1、Ki67在宮頸癌惡性增殖過(guò)程中的作用與聯(lián)系，以期為宮頸癌的深入研究提供新的思路和方法。
　　 方法：首先，采用免疫細(xì)胞化學(xué)、Western Blot、ELISA檢測(cè)人宮頸癌株C33A、Siha、Caski中MIF、CD74、PI3K、cyclinD1、Ki67的表達(dá)；其次，利用細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)(MTT)

3、觀察人重組MIF刺激后宮頸癌細(xì)胞株C33A、Siha的增殖情況，并通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)、Western blot技術(shù)檢測(cè)在人重組MIF刺激后MIF、PI3K、cyclinD1、Ki67在細(xì)胞株中的蛋白表達(dá)；最后，再次運(yùn)用MTT法檢測(cè)ISO-1(MIF特異抑制劑)對(duì)宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞株Caski增殖作用的影響，采用免疫細(xì)胞化學(xué)、Western blot、ELISA檢測(cè)MIF、PI3K、cyclinD1、Ki67在ISO-1處理后的Caski細(xì)胞

4、株中的蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：MIF、CD74、PI3K、cyclinD1、Ki67在人宮頸癌細(xì)胞株C33A、Siha、Caski中均有陽(yáng)性表達(dá)，且在高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株Caski中的表達(dá)最高，其次為在HPV16陽(yáng)性的Siha細(xì)胞中的表達(dá)，在HPV陰性的C33A細(xì)胞中的表達(dá)最弱，三者相比差異有顯著性(P＜0.05)；同樣，上述三種宮頸癌細(xì)胞株均可分泌一定量的MIF蛋白，在高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株Caski中的分泌量明顯高于HPV16陽(yáng)性的Siha細(xì)

5、胞，在HPV陰性的C33A細(xì)胞中的表達(dá)最弱，三者相比差異有顯著性(P＜0.05)。
　　 人重組MIF可明顯促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞的增殖活性，并且促進(jìn)MIF、PI3K、cyclinD1、Ki67各細(xì)胞中的蛋白表達(dá)。
　　 給予MIF特異抑制劑ISO-1后，人宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞株Caski的增殖活性明顯降低，MIF、PI3K、cyclinD1、Ki67的蛋白表達(dá)量顯著下降。
　　 結(jié)論：MIF在各宮頸癌細(xì)胞株中表達(dá)程度不同，

6、其表達(dá)強(qiáng)弱與宮頸癌細(xì)胞高危型HPV感染及轉(zhuǎn)移潛能有關(guān)，說(shuō)明MIF是參與炎癥與腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要細(xì)胞因子。MIF可直接促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞的增殖，或通過(guò)上調(diào)cyclinD1的表達(dá)，進(jìn)而影響細(xì)胞周期進(jìn)展，促進(jìn)癌細(xì)胞的惡性增殖。ISO-1可直接抑制MIF在宮頸癌細(xì)胞中的表達(dá)與分泌，抑制宮頸癌細(xì)胞的增殖，或下調(diào)cyclinD1的表達(dá)，降低宮頸癌細(xì)胞的增殖活性。
　　 這一過(guò)程可能需要PI3K/Akt細(xì)胞信號(hào)通路的參與，但其具體機(jī)制需進(jìn)一步研究