MIF在不同宮頸癌細胞株中的表達及對宮頸癌細胞株增殖的影響.pdf

1、宮頸癌，是最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率位于女性腫瘤的第二位。山西省是國內外罕見的宮頸癌高發(fā)區(qū)，且發(fā)病人群有年輕化趨勢，因此宮頸癌是嚴重威脅我省婦女健康的疾病之一。腫瘤的主要特征是惡性細胞的持續(xù)性增殖。本課題組前期對早期宮頸鱗癌(SCC)進行了cDNA基因芯片篩查，發(fā)現(xiàn)MIF在早期宮頸鱗癌有淋巴轉移組織中表達上調，提示MIF可能促進宮頸癌的發(fā)生發(fā)展。
　　 目的：研究MIF、CD74、PI3K、cyclinD1、Ki67在人宮頸癌

2、細胞株C33A、Siha、Caski中的表達，探索MIF與CD74在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的作用，探索MIF和PI3K、cyclinD1、Ki67在宮頸癌惡性增殖過程中的作用與聯(lián)系，以期為宮頸癌的深入研究提供新的思路和方法。
　　 方法：首先，采用免疫細胞化學、Western Blot、ELISA檢測人宮頸癌株C33A、Siha、Caski中MIF、CD74、PI3K、cyclinD1、Ki67的表達；其次，利用細胞增殖實驗(MTT)

3、觀察人重組MIF刺激后宮頸癌細胞株C33A、Siha的增殖情況，并通過免疫細胞化學、Western blot技術檢測在人重組MIF刺激后MIF、PI3K、cyclinD1、Ki67在細胞株中的蛋白表達；最后，再次運用MTT法檢測ISO-1(MIF特異抑制劑)對宮頸癌腸轉移細胞株Caski增殖作用的影響，采用免疫細胞化學、Western blot、ELISA檢測MIF、PI3K、cyclinD1、Ki67在ISO-1處理后的Caski細胞

4、株中的蛋白表達。
　　 結果：MIF、CD74、PI3K、cyclinD1、Ki67在人宮頸癌細胞株C33A、Siha、Caski中均有陽性表達，且在高轉移細胞株Caski中的表達最高，其次為在HPV16陽性的Siha細胞中的表達，在HPV陰性的C33A細胞中的表達最弱，三者相比差異有顯著性(P＜0.05)；同樣，上述三種宮頸癌細胞株均可分泌一定量的MIF蛋白，在高轉移細胞株Caski中的分泌量明顯高于HPV16陽性的Siha細

5、胞，在HPV陰性的C33A細胞中的表達最弱，三者相比差異有顯著性(P＜0.05)。
　　 人重組MIF可明顯促進宮頸癌細胞的增殖活性，并且促進MIF、PI3K、cyclinD1、Ki67各細胞中的蛋白表達。
　　 給予MIF特異抑制劑ISO-1后，人宮頸癌腸轉移細胞株Caski的增殖活性明顯降低，MIF、PI3K、cyclinD1、Ki67的蛋白表達量顯著下降。
　　 結論：MIF在各宮頸癌細胞株中表達程度不同，

6、其表達強弱與宮頸癌細胞高危型HPV感染及轉移潛能有關，說明MIF是參與炎癥與腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要細胞因子。MIF可直接促進宮頸癌細胞的增殖，或通過上調cyclinD1的表達，進而影響細胞周期進展，促進癌細胞的惡性增殖。ISO-1可直接抑制MIF在宮頸癌細胞中的表達與分泌，抑制宮頸癌細胞的增殖，或下調cyclinD1的表達，降低宮頸癌細胞的增殖活性。
　　 這一過程可能需要PI3K/Akt細胞信號通路的參與，但其具體機制需進一步研究