S100A2在胰腺癌耐放射細胞株中的異常表達.pdf

1、胰腺癌屬高度惡性腫瘤，雖然手術切除能夠提高胰腺癌患者的生存率，但多數(shù)患者就診時已屬晚期，只有20％的病人可以行手術治療，術后5年生存率不超過5％。除手術外，放射治療是目前治療胰腺癌、預防術后復發(fā)、延長病人生存時間和提高生存質(zhì)量的重要輔助治療手段之一。但放射治療對不同胰腺癌患者的療效差別較大；而在同一個患者的治療過程中，隨著放射治療的進行，療效也逐漸下降，即出現(xiàn)了放射治療后期腫瘤的輻射抗性與加速再增殖現(xiàn)象。因此如何提高放射治療的療效是目前

2、胰腺腫瘤治療領域研究的熱點之一。隨著腫瘤放射生物學的研究深入，目前已發(fā)現(xiàn)p53、p21、Bcl-2家族和survivin等基因及其表達產(chǎn)物與胰腺癌放射生物學特性之間有密切的關系。如，攜帶survivin、突變型p53基因的胰腺癌細胞對放射耐受；通過降低survivin的表達可降低了胰腺癌細胞的耐放射性。多數(shù)研究結(jié)果提示，部分促進腫瘤生長基因的高表達和抑癌基因的低表達或缺失可能與腫瘤的耐放射性有關。為了預測胰腺癌的放射治療效果和對耐放射進

3、行干預，我們前期工作對已建立的胰腺癌細胞株和耐放射亞株作基因芯片高通量篩查，發(fā)現(xiàn)在耐放射亞株增高和低表達的基因中，S100A2在耐放射細胞株與親本株中表達差異較大，于是選其作進一步驗證和深入研究。 鈣結(jié)合蛋白S100A2是S100A2蛋白家族中唯一的與腫瘤生長呈負相關的蛋白，由于它在正常組織中表達，而在相應的腫瘤組織和細胞中表達水平低或缺失，且表達S100A2的腫瘤侵襲及轉(zhuǎn)移率低、預后好，故目前普遍認為S100A2基因為抑癌基因

4、。既往研究表明S100A2的表達水平與細胞周期有密切關系；另外還發(fā)現(xiàn)S100A2參與細胞內(nèi)的氧化還原反應、與氧化損傷有關；其增強的靶基因可能為抑癌基因RUNX3；其抑制的靶基因可能為促進腫瘤生長的腫瘤相關基因，其中EGFR和NFKB2與腫瘤的耐放射性有關。S100A2以上諸多特性均與腫瘤的方射生物學特性有關(如，細胞周期各時相的比例對細胞對放射線的敏感性影響較大)，因此推測其表達情況可能影響胰腺癌的放射生物學特性。但S100A2的表達情

5、況是否與胰腺癌的放射生物學特性相關，目前尚未見報道。有必要進一步研究。 研究目的： 研究S100A2與胰腺癌放射生物學特性的關系。 研究方法： 1．檢測胰腺癌細胞株及其繼發(fā)耐放射亞株中S100A2 mRNA及蛋白質(zhì)表達水平的差異。 2．檢測通過去甲基化藥物增強S100A2表達后相應胰腺癌細胞株放射生物學特性的改變。 3．特異增強S100A2表達后胰腺癌細胞株耐放射亞株放射生物學特性的改變。

6、 4．特異使S100A2沉默后胰腺癌細胞親本株放射生物學特性的變化。 研究結(jié)果： 1．胰腺癌細胞株SWl990耐放射亞株較親本株基因S100A2的表達水平明顯降低(2～3倍)。 2．耐放射細胞株經(jīng)5-氮雜-2-脫氧胞苷處理后Sl00A2的mRNA、蛋白質(zhì)水平均較用藥前明顯升高(2～5倍)，G2期比例增高，且處理后的細胞株耐放射性明顯降低。 3．轉(zhuǎn)基因S100A2后，SWl990耐放射亞株的G2期細

7、胞比例明顯升高，其放射耐受性明顯降低。 4．RNA干擾降低SWl990親本株S100A2的表達后，其G2期細胞明顯降低，G1期細胞比例升高，其耐放射性增強。 研究結(jié)論 1．胰腺癌細胞株SWl990繼發(fā)耐放射亞株基因S100A2的表達較其親本株明顯降低。 2．5-氮雜-2-脫氧胞苷使基因S100A2在胰腺癌細胞株SWl990繼發(fā)耐放射亞株中重表達。 3．S100A2的表達影響胰腺癌細胞株SWl990