偏側咀嚼對大鼠咬肌肌纖維表型及MyHC異構型基因表達的影響.pdf

1、目的：
　　通過建立大鼠偏側咀嚼動物模型，探查偏側咀嚼對咬肌肌纖維表型特征的影響，探討偏側咀嚼狀態(tài)下咬肌肌纖維肌球蛋白重鏈(myosin heavy chain，MyHC)異構型基因表達水平的變化；分析MyHC異構型蛋白的基因表達水平的變化與肌纖維表型的相關性，闡明偏側咀嚼對咀嚼肌結構和生理特征的影響，為揭示咬合異常所致咀嚼肌結構與功能紊亂的致病機制提供實驗依據(jù)。
　　方法：
　　SPF級8周齡雄性SD大鼠40只，隨機

2、分為8組，每組5只。分別為單側拔牙建模2、4、6及8周組，以上各組均設立同期對照組。單側拔牙模型組大鼠在1％戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉下拔除右上頜所有磨牙，建立偏側咀嚼模型。應用肌球蛋白三磷酸腺苷酶(adenosine triphosphatase，ATPase)染色法檢查大鼠咬肌肌纖維表型特征，觀察各亞型肌纖維的空間定位、分布與排列，并利用圖像分析軟件和統(tǒng)計分析軟件對數(shù)據(jù)進行量化處理；利用實時熒光定量PCR技術檢測MyHC各異構型蛋白的基

3、因相對表達量；對咬肌各亞型肌纖維的含量與MyHC各異構型蛋白的基因相對表達量進行相關性分析。
　　結果：
　　ATPase染色結果表明正常SD雄性大鼠咬肌主要由ⅡA型肌纖維組成，約占64%。在大量ⅡA型纖維分布區(qū)域，含有27%左右的ⅡB型纖維。Ⅰ型肌纖維約占9%，且主要分布于咬肌深部。在實驗周期內不同周齡的正常大鼠上述肌纖維亞型比例無明顯變化。偏側咀嚼模型建立后，雙側咬肌均出現(xiàn)肌纖維各亞型比例及MyHC各異構型蛋白mRNA表

4、達水平的變化，其變化呈現(xiàn)出雙側不對稱性及隨時間推移的動態(tài)性變化。建模后2周，雙側咬肌Ⅰ型肌纖維比例及MyHC-ⅠmRNA表達水平均上調，且兩者在非拔牙側的表達均高于拔牙側(P<0.05)，而ⅡA型肌纖維的構成比下降，提示快縮氧化型肌纖維向慢縮氧化型肌纖維的轉化，但MyHC-Ⅱa mRNA表達無明顯變化。建模后期，與對照組比較，拔牙側Ⅰ型肌纖維的比例及MyHC-Ⅰ基因表達持續(xù)上調(P<0.05)，而ⅡA型肌纖維比例呈現(xiàn)下降趨勢(P<0.0

5、5)；在非拔牙側，MyHC各型肌纖維比例及基因表達水平則基本恢復至正常水平。雙側咬肌Ⅰ型、ⅡA型肌纖維的比例及 MyHC-Ⅰ基因表達水平比較差異具有顯著性(P<0.05)。ATPase染色結果與MyHC異構型mRNA表達水平的變化具有相對的一致性。
　　結論：
　　正常大鼠咬肌肌纖維以ⅡA型纖維為主，表現(xiàn)為快速收縮而不易疲勞的生理特性；偏側咀嚼可使大鼠咬肌肌纖維表型特征發(fā)生改變，且伴有肌纖維 MyH C各異構型基因表達水平的