雌激素對實驗性腎間質(zhì)纖維化大鼠的作用機制研究.pdf

1、目的:腎間質(zhì)纖維化(Tubulointerstitialfibrosis，TIF)是慢性腎臟疾病進展至終末期腎功能衰竭的必然病理變化。與腎小球硬化相比，腎間質(zhì)纖維化的程度與腎功能損害的程度有更高的相關(guān)性，故常以間質(zhì)纖維化作為評價各種腎臟疾病進展程度的可靠指標(biāo)。目前大量的實驗和臨床觀察證實雌激素及其代謝產(chǎn)物具有腎臟保護作用，但對腎間質(zhì)纖維化的作用及可能機制尚不十分清楚，對此，本實驗采用單側(cè)輸尿管結(jié)扎(unilateralureteralo

2、bstruction，UUO)大鼠模型，形成腎間質(zhì)纖維化，并通過切除雙側(cè)卵巢和注射外源性雌激素造成各組大鼠不同的雌激素水平，旨在觀察雌激素對實驗動物梗阻側(cè)腎組織形態(tài)學(xué)變化以及對轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforminggrowthfactor-β1，TGF-β1)、a-平滑肌動蛋白(a-smoothmuscleactin，a-SMA)和金屬蛋白酶組織抑制因子-1(tissueinhibitorofmetalloproteinase-1

3、，TIMP-1)表達的影響，初步探討其對腎間質(zhì)纖維化的拮抗作用及機理。 方法:成熟雌性SD大鼠30只，隨機分為對照組，高雌激素組，生理雌激素組和低雌激素組。低雌激素組行去勢手術(shù)，即切除雙側(cè)卵巢(ovariectomized，OVX)，高雌激素組和生理雌激素組僅行OVX假手術(shù)；術(shù)后4周，除對照組外，各組大鼠結(jié)扎左側(cè)輸尿管，并在手術(shù)當(dāng)天給予高雌激素組腹腔注射17β-雌二醇，另外三組則注射麻油作為對照。UUO術(shù)后21天處死所有大鼠，取

4、左側(cè)腎組織進行病理染色，在光鏡下觀察腎組織形態(tài)學(xué)變化；免疫組化方法檢測TGF-β1、a-SMA和TIMP-1蛋白的表達；并用RT-PCR方法檢測腎組織a-SMA和TIMP-1mRNA的表達。 結(jié)果:(1)腎組織PAS和Masson染色顯示：UUO組腎間質(zhì)可見炎性鈿胞浸潤、腎小管萎縮壞死和纖維組織增生等改變。而在低雌激素組，上述纖維化的改變最為明顯，隨著雌激素水平的提高，纖維化病變則有顯著減輕。與生理雌激素組相比，低雌激素組腎小管

5、間質(zhì)損傷指數(shù)上升(p＜0.05)，高雌激素組則明顯下降(p＜0.05)；(2)免疫組化結(jié)果顯示：UUO組大鼠腎間質(zhì)TGF-β1、a-SMA和TIMP-1蛋白表達增加，和對照組相比有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.01)。在各UUO組中，和生理雌激素組相比，低雌激素組上述物質(zhì)表達增多(p＜0.05)，高雌激素組上述物質(zhì)表達則減少(p＜0.05)；(3)RT-PCR結(jié)果顯示：和對照組相比，各UUO組a-SMA和TIMP-1mRNA表達均增多(p＜0.0