能量限制通過(guò)調(diào)節(jié)IGF-1水平影響成年雌性大鼠生殖潛能.pdf

1、研究目的：
　　觀(guān)察能量限制（CaloricRestrictionCR）對(duì)成年雌性大鼠生殖軸及卵泡發(fā)育的影響，并對(duì)其可能的調(diào)控機(jī)制進(jìn)行探討。
　　材料與方法：
　　取8周齡雌性SD大鼠39只，體重200±20g。適應(yīng)性喂養(yǎng)2周后隨機(jī)分為：對(duì)照組；25％CR組和45%CR組共3組，單籠飼養(yǎng)，自由攝水。記錄對(duì)照組每日攝食量，并將此攝食量的75%和55%分別喂養(yǎng)25%CR和45%CR組大鼠。限食實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后每日給予陰道涂片觀(guān)察

2、動(dòng)情周期變化并記錄食物攝入量，每周監(jiān)測(cè)體重變化一次。在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后第1，4，7，10周分別取血一次監(jiān)測(cè)血清胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGF-1）及性激素（雌激素，黃體生成素，卵泡刺激素）和的變化。實(shí)驗(yàn)第10周處死大鼠，取卵巢組織進(jìn)行切片（每張切片之間至少間隔200μm），蘇木精-伊紅染色觀(guān)察各級(jí)卵泡并計(jì)數(shù)：從卵巢最大切面往兩邊依次選取7張組織切片用于HE染色，計(jì)數(shù)每張卵巢組織切片上各級(jí)卵泡數(shù)量，計(jì)算7張切片上卵泡總數(shù)和各級(jí)卵泡數(shù)量占卵泡總數(shù)的百分

3、比例。所有數(shù)據(jù)以X±SEM表示，組間比較用方差分析和卡方檢驗(yàn)。免疫組化染色觀(guān)察胰島素樣生長(zhǎng)因子-1在卵巢組織中的表達(dá)與定位。
　　結(jié)果：
　　1）在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中對(duì)照組大鼠體重持續(xù)明顯上升，25%CR組大鼠體重僅有小幅上升，45%CR組大鼠體重則出現(xiàn)了小幅下降。在實(shí)驗(yàn)第2周時(shí)45%CR組體重與對(duì)照組比較已經(jīng)出現(xiàn)明顯差異（210.17±6.18gVS188.73±3.10g，p<0.05）。在實(shí)驗(yàn)第3周時(shí)25%CR組體重與對(duì)照組比

4、較也有了顯著差異（230.00±7.38gVS205.42±3.38g，p<0.05）。
　　2）動(dòng)情周期的監(jiān)測(cè)結(jié)果為：對(duì)照組大鼠整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中都表現(xiàn)為規(guī)則的動(dòng)情。25%CR組大鼠有25%動(dòng)情周期不規(guī)則，主要表現(xiàn)在動(dòng)情周期的延長(zhǎng)，平均為7.8±0.6天，45%CR組有60%動(dòng)情周期不規(guī)則，主要表現(xiàn)在動(dòng)情周期的延長(zhǎng)，也有個(gè)別大鼠表現(xiàn)為持續(xù)動(dòng)情（最長(zhǎng)持續(xù)動(dòng)情23天）。
　　3）血清免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)提示IGF-1水平隨著能量攝入的減少而

5、不斷下降。45%CR組大鼠在實(shí)驗(yàn)第7周時(shí)血清IGF-1水平(8.54±0.56μg/L)較第1周(12.26±0.57μg/L)已經(jīng)開(kāi)始出現(xiàn)明顯的下降（p<0.05），而25%CR組大鼠至實(shí)驗(yàn)第10周時(shí)才出現(xiàn)顯著差異(9.69±0.79μg/LVS12.23±0.82μg/L，P<0.05）。能量攝入的減少使雌激素水平下降，但是卵泡刺激素與黃體生成素并沒(méi)有因?yàn)榇萍に氐南陆捣瓷湫缘纳?。雌激素，黃體生成素和卵泡刺激素均呈下降趨勢(shì)。

6、　　4）組織學(xué)分析提示了25%及45%組的大鼠卵巢相對(duì)于對(duì)照組有更多的原始卵泡（97.92±9.06；129.4±7.79VS39.33±3.28，P<0.05）和更多的存活卵泡（219.58±15.31；234.80±12.53VS154.83±8.05，P<0.05）。免疫組化提示IGF-1主要在存活的卵母細(xì)胞的胞漿中表達(dá)。
　　結(jié)論：
　　能量限制能夠通過(guò)降低IGF-1水平抑制下丘腦-垂體-卵巢這一生殖軸，抑制FSH，