外源性非酶糖基化終產(chǎn)物對健康大鼠視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的影響.pdf

1、目的:糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)是糖尿病最為常見和嚴(yán)重的并發(fā)癥之一，已成為當(dāng)今世界四大致盲疾病之一。而視網(wǎng)膜新生血管是導(dǎo)致玻璃體出血、視網(wǎng)膜脫離，最終患者視力喪失的根本原因。盡管近年來對DR進(jìn)行了大量的、卓有成效的研究，但具體的發(fā)病機(jī)制仍不完全清楚。有研究表明，蛋白質(zhì)非酶糖化和糖基化終產(chǎn)物的形成與視網(wǎng)膜新生血管和DR發(fā)生有密切關(guān)系。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是目前公認(rèn)的最強(qiáng)的內(nèi)皮細(xì)胞選擇性促有絲分裂因子和血管生成因子，能特異性地刺激血管

2、內(nèi)皮細(xì)胞增殖，參與新生血管的形成過程，被認(rèn)為是與DR新生血管形成聯(lián)系最緊密的一個因子。 本研究通過短期注射外源性非酶糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)至健康大鼠體內(nèi)，在視網(wǎng)膜還沒有觀察到新生血管改變之前，結(jié)合免疫組織化學(xué)檢測觀察外源性AGEs對視網(wǎng)膜組織中VEGF表達(dá)的影響及其與糖尿病視網(wǎng)膜病變的關(guān)系，使我們對DR的發(fā)生有進(jìn)一步的了解。 方法:應(yīng)用鼠血清白蛋白(RSA)體外孵育AGEs修飾蛋白(AGEs-RSA)。采用熒光分光光

3、度分析法鑒定AGEs-RSA。 30只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為3組，正常對照組，RSA對照組，AGEs-RSA組，分別自尾緣靜脈注入生理鹽水，RSA，AGEs-RSA，每日一次，連續(xù)兩周。 取大鼠視網(wǎng)膜行HE染色及VEGF免疫組織化學(xué)檢查。 結(jié)果RSA與D-葡萄糖孵育8周后形成較粘稠的棕色產(chǎn)物，其在370nm波長的激發(fā)光下，在440nm的發(fā)射波長下產(chǎn)生的熒光值為43.27U/mg。 HE染色觀察：注射

4、AGEs-RSA大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)核層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層細(xì)胞排列疏松，細(xì)胞間隙增大，細(xì)胞數(shù)減少。 VEGF在視網(wǎng)膜中的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層及內(nèi)核層中呈陽性表達(dá)，AGEs-RSA組表達(dá)明顯增強(qiáng)，其平均灰度值111.54±3.45，與正常對照組及RSA組相比，差別有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論:1.外源性非酶糖基化終產(chǎn)物能作為獨立因素導(dǎo)致視網(wǎng)膜組織損害。 2.外源性非酶糖基化終產(chǎn)物可引起正常大鼠視網(wǎng)膜組織VEGF表達(dá)增高，二者可能共同參與糖尿病