熱處理對STZ-糖尿病性白內障晶狀體上皮細胞的影響.pdf

1、目的：熱休克反應是機體對一系列損傷的一種快速的、短暫的、保守的細胞應激反應過程，可保護細胞免于進一步的毒性損害。它包括一些特殊基因片段的激活，并合成保護細胞的熱休克蛋白fheat shock protein，HSP)。HSP是生物體在不良環(huán)境因素作用下所產(chǎn)生的一組具有高度保守性的應激蛋白。按分子量的大小，HSP分為5類，即HSP110、HSP90、HSP70、HSP40和sHSP。晶狀體中AA2晶狀體蛋白、AB2晶狀體蛋白和HSP27屬

2、于sHSP家族。熱休克、氧化應激、亞砷酸鈉及高滲等均司誘導HSP70、HSP27的表達。為探討HSP在糖尿病性白內障發(fā)生、發(fā)展中的作用，本課題在糖尿病性白內障動物模型建立的基礎上，研究STZ性白內障的晶狀體上皮細胞((lens epithelial cells，LECs)熱休克預處理后HSP70的表達情況以及晶狀體生化指標的變化和可溶性蛋白的含量變化情況。 方法：將30只SD大鼠隨機分為三組：A組為空白對照組：正常喂養(yǎng)不給予任何

3、處理；B組為STZ組：正常喂養(yǎng)三天，腹腔注射STZ(55mg/kg)，三天后測量血糖濃度>16.65mmol/L；C組為熱處理STZ組：正常喂養(yǎng)三天，以10﹪水合氯醛麻醉后，置于45℃水浴箱中維持15min，常溫下放置2小時，腹腔注射STZ(55mg/kg)，隔日水浴一次，三天后測量血糖濃度>16．65mmol/L。每周用裂隙燈觀察晶狀體的變化，在實驗六周后分別摘取眼球，取出晶狀體。采用免疫組化技術檢測HSP70在各組LECs中的表達；

4、運用考馬斯亮蘭與呈色法測定各組可溶性蛋白的濃度；呈色法測OD值，檢測各組N-醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及非蛋白旒基(GSH)的含量。 結果： 1．裂隙燈檢查每周A、B、C各組晶狀體的混濁情況：B、C兩組晶狀體的混濁情況差異具有統(tǒng)計學意義，B組混濁程度明顯高于C組。A、C兩組差異不顯著。 2．采用免疫組化技術檢測HSP70在各組LECs中的表達：C組HSP70的表達高于B組，差異具有統(tǒng)計學意義。B組HSP70的