蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期腦損傷和亞低溫保護(hù)作用.pdf

1、目的：蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期腦損傷是重度腦動(dòng)脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血(AmSAH)的主要死亡原因。然而AmSAH急性期腦損傷的研究卻尚未廣泛開展，目前還沒(méi)有有效的腦保護(hù)措施來(lái)減輕這種早期腦損傷。亞低溫作為一種重要的輔助治療手段可以明顯減輕腦缺血半暗帶腦組織的損傷程度。研究AmSAH急性期腦損傷的病理機(jī)理，探究亞低溫對(duì)腦組織的保護(hù)機(jī)制，對(duì)于重度AmSAH的治療有重要意義。 方法：本實(shí)驗(yàn)采用SD大鼠視交叉池注血模型，研究AmSAH急性期腦

2、損傷。先根據(jù)體溫分常溫組和亞低溫兩個(gè)大組，再根據(jù)激光多譜勒腦血流儀監(jiān)測(cè)的腦血流量降低程度和持續(xù)時(shí)間將每個(gè)大組細(xì)分為中度SAH2小時(shí)、中度SAH4小時(shí)、重度SAH2小時(shí)、重度SAH4小時(shí)；中度SAH亞低溫2小時(shí)、中度SAH亞低溫4小時(shí)、重度SAH亞低溫2小時(shí)、重度SAH亞低溫4小時(shí)，共8個(gè)亞組。對(duì)照組常溫下注入0.3ml生理鹽水。測(cè)定以下指標(biāo)：1)用透射電鏡觀察海馬CA1區(qū)損傷情況；2)以極譜法測(cè)定蘋果酸+丙酮酸為底物的腦線粒體態(tài)3呼吸速

3、率、態(tài)4呼吸速率；3)以熒光素?zé)晒馑孛赴l(fā)光發(fā)測(cè)定ATP合成速率；4)以熒光法測(cè)定線粒體能化態(tài)膜電位；5)以熒光法測(cè)定線粒體活性氧的生成速率；6)以酶學(xué)方法測(cè)定線粒體Mn-SOD酶活性；7)以TBA法分別測(cè)定線粒體脂質(zhì)過(guò)氧化水平；8)以RT-PCR法測(cè)定腦組織中胞漿型磷脂A2(PLA2)和缺氧誘導(dǎo)因子(HIF-1)mRN表達(dá)。 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)共用90只SD大鼠，成功制作出72只SAH視交叉池注血模型，死亡12只。電鏡顯示各SAH常溫組

4、表現(xiàn)為不同程度的細(xì)胞水腫和壞死，各SAH亞低溫組細(xì)胞水腫和壞死明顯減輕。與假手術(shù)組比較：SAH4小時(shí)組產(chǎn)生活性氧顯著性上升；線粒體SOD活性無(wú)著性差異；線粒體MDA僅重度SAH損傷4小時(shí)組顯著性上升。各SAH常溫組：線粒體呼吸Ⅲ態(tài)、RCR均顯著性下降，并隨著SAH程度的加重和時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)加重的趨勢(shì)；SAH4小時(shí)組ATP合成能力顯著性減少；各SAH組線粒體呼吸Ⅳ態(tài)和膜電位上升，并隨著SAH程度的加重和時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)加重的趨勢(shì)，SAH4小

5、時(shí)組顯著性上升。與相同SAH程度和時(shí)間的常溫組比較：各SAH亞低溫組的呼吸Ⅳ態(tài)減少，膜電位也減少，相應(yīng)的活性氧也顯著減少，亞低溫未能增加ATP的合成能力。各SAH組Ⅳ-cPLA2轉(zhuǎn)錄水平隨著SAH程度的加重和時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)加重的趨勢(shì)，其中SAH4小時(shí)組顯著性上升；與相同SAH程度和時(shí)間的常溫組比較：SAH亞低溫4小時(shí)組顯著降低Ⅳ-cPLA2mRNA水平。重度SAH組HIF-1amRNA水平顯著性上升，與相同SAH程度和時(shí)間的常溫組比較：

6、重度SAH亞低溫組HIF-1amRNA水平呈現(xiàn)著性上升。 結(jié)論：1)大鼠視交叉池注血模型研究腦動(dòng)脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期腦損傷，能夠很好地模仿蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期全腦血流變化，蛛網(wǎng)膜下腔突然的積血使全腦血流出現(xiàn)快速下降而后緩慢上升的病理生理變化，造成蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期腦組織水腫和壞死，腦損傷程度隨著蛛網(wǎng)膜下腔出血程度加重和時(shí)間延長(zhǎng)，呈加重的趨勢(shì)。在蛛網(wǎng)膜下腔出血早期施加亞低溫可以明顯減輕蛛網(wǎng)膜下腔出血造成的腦組織水腫和壞死，

7、起到了明顯的腦保護(hù)作用，亞低溫的治療效果與時(shí)間窗有關(guān)。2)腦動(dòng)脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期存在的脂質(zhì)過(guò)氧化和磷脂酶破壞細(xì)胞膜的共同腦損傷機(jī)理。腦動(dòng)脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期的全腦血流變化形式使線粒體內(nèi)膜受損，氧化磷酸化效率降低，ATP合成受損，電子漏增加，活性氧產(chǎn)生大于清除能力，造成腦組織脂質(zhì)過(guò)氧化損傷。亞低溫能夠減少機(jī)體ATP消耗，減少電子漏，降低活性氧的產(chǎn)生，因而能減少腦組織脂質(zhì)過(guò)氧化損傷。3)在腦動(dòng)脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期，鈣依賴