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1、目的:采用環(huán)氧化合物交聯(lián)新型肺動(dòng)脈血管替代物之一牛頸靜脈帶瓣管道,評(píng)價(jià)牛頸靜脈帶瓣管道的生物學(xué)性能,探討其處理制備的新型技術(shù)。 方法:新鮮牛頸靜脈帶瓣管道24根,隨機(jī)分為環(huán)氧化合物結(jié)合肝素處理組(PC組,n=8),戊二醛處理組(GA組,n=8)及新鮮對(duì)照組(Fresh組n=8)。測(cè)量各組處理前后管壁厚度,管腔外徑及瓣膜的抗返流性能的變化。測(cè)定各組處理前后的組織含水量,熱皺縮溫度,交聯(lián)指數(shù)和氨基酸成分以評(píng)價(jià)其交聯(lián)特點(diǎn)。通過(guò)觀察組織
2、斷裂強(qiáng)度,斷裂延伸率評(píng)價(jià)其機(jī)械性能。采用膠原酶降解實(shí)驗(yàn)分析組織穩(wěn)定性。通過(guò)大鼠皮下包埋體內(nèi)加速化鈣動(dòng)物模型,應(yīng)用原子吸收光譜法測(cè)定組織鈣含量,von kossa鈣鹽染色觀察組織鈣化情況,并對(duì)比研究包埋后牛頸靜脈組織光鏡及電鏡結(jié)構(gòu)變化,通過(guò)在牛頸靜脈上種植內(nèi)皮細(xì)胞觀察兩種方法交聯(lián)制備的牛頸靜脈的細(xì)胞毒性。 結(jié)果:PC組外觀形態(tài),管腔外徑,瓣膜抗返流功能更接近天然血管;PC組與GA組機(jī)械強(qiáng)度相當(dāng),兩組均明顯強(qiáng)于Fresh組(P<0.
3、05),PC組斷裂延伸率大于GA組且兩組均低于Fresh組;PC組和GA組固定72小時(shí)固定指數(shù)相當(dāng),氨基酸分析結(jié)果顯示發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)的氨基酸成分略有不同;體外酶降解結(jié)果顯示,PC組和GA組組織穩(wěn)定性較Fresh組增高(p<0.05),但GA組和PC組之間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;大鼠皮下包埋后PC組管壁和瓣膜的鈣含量顯著低于GA組(p<0.05),組織學(xué)觀察示GA組膠原變性溶解,炎癥細(xì)胞侵潤(rùn),PC組膠原結(jié)構(gòu)僅輕微變性,細(xì)胞種植結(jié)果示戊二醛處理組牛頸
4、靜脈血管片上無(wú)內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng),環(huán)氧化合物處理組牛頸靜脈血管片上可見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng),環(huán)氧化合物交聯(lián)制備的牛頸靜脈細(xì)胞毒性顯著低于戊二醛組。 結(jié)論:環(huán)氧化合物交聯(lián)牛頸靜脈帶瓣管道是一種有效的生物組織處理制備的新型技術(shù),它能有效改善牛頸靜脈管道的性能(抗鈣化性能、機(jī)械性能、細(xì)胞毒性)。 目的:研究環(huán)氧化合物交聯(lián)制備的牛頸靜脈帶瓣管道用于重建犬右室一肺動(dòng)脈連接后,在體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)中與血流接觸的條件下的血流動(dòng)力學(xué)性能及其抗鈣化性能。
5、 方法:本研究以經(jīng)環(huán)氧化合物交聯(lián)結(jié)合肝素處理的牛頸靜脈帶瓣管道為研究對(duì)象,以單純戊二醛交聯(lián)固定的牛頸靜脈帶瓣管道作為對(duì)照,建立犬重建右心室一肺動(dòng)脈連接的動(dòng)物模型。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)觀察10個(gè)月后,通過(guò)超聲心動(dòng)圖檢查、心導(dǎo)管檢查等方法評(píng)價(jià)二種不同方法交聯(lián)制備的牛頸靜脈帶瓣管道重建犬右心室一肺動(dòng)脈連接后的血流動(dòng)力學(xué)性能,并觀察牛頸靜脈管道內(nèi)的瓣膜在犬的右心系統(tǒng)內(nèi)的功能。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屠宰后取出標(biāo)本,通過(guò)組織形態(tài)學(xué)觀察了解其抗血栓性能;采用原子吸收光
6、譜法測(cè)定組織鈣含量,von kossa鈣鹽染色觀察組織鈣化情況,從而對(duì)比研究二種不同方法處理的牛頸靜脈帶瓣管道在體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)中與血流接觸情況下的抗鈣化性能。 結(jié)果:戊二醛組有2只犬分別于術(shù)后第5月和第7月死亡,解剖發(fā)現(xiàn)分別有血栓形成和遠(yuǎn)端吻合口狹窄。環(huán)氧化合物組1只犬于術(shù)后1月死亡,解剖發(fā)現(xiàn)胸腔嚴(yán)重感染,其他動(dòng)物均健康成活10月。心臟超聲顯示兩組管道均通暢,瓣葉活動(dòng)良好。環(huán)氧化合物交聯(lián)制備組術(shù)中結(jié)扎肺動(dòng)脈前、后直接測(cè)壓及術(shù)后10
7、個(gè)月通過(guò)心導(dǎo)管測(cè)壓,所測(cè)得的跨瓣壓差維持在較低水平,特別是術(shù)后l0個(gè)月,心導(dǎo)管測(cè)得跨瓣壓差無(wú)明顯升高;環(huán)氧化合物交聯(lián)制備組術(shù)中結(jié)扎肺動(dòng)脈前、后及術(shù)后10個(gè)月測(cè)得的右室舒張壓均保持低水平;環(huán)氧化合物組管道于術(shù)中結(jié)扎肺動(dòng)脈前、后及術(shù)后10個(gè)月測(cè)得跨瓣壓差無(wú)明顯升高,其結(jié)果與戊二醛組管道相似。環(huán)氧化合物組管道血管壁鈣含量為7.58±1.02 ug/mg,戊二醛組管道血管壁鈣含量為21.05±2.78 u g/mg,統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異(P<0
8、.05);環(huán)氧化合物組和戊二醛組管道瓣膜鈣含量分別為0.98±0.21ug/mg和1.07±0.39 ug/mg,二者相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。組織學(xué)檢查結(jié)果示環(huán)氧化合物組膠原結(jié)構(gòu)保持完好,而戊二醛組膠原變性,炎癥細(xì)胞侵潤(rùn)。 結(jié)論: 1、環(huán)氧化合物交聯(lián)制備的牛頸靜脈帶瓣管道可用于重建右室一肺動(dòng)脈連接,血流動(dòng)力性能良好,與自體肺動(dòng)脈相當(dāng),遠(yuǎn)期血流動(dòng)力學(xué)性能尚待進(jìn)一步觀察研究。 2、環(huán)氧化合物交聯(lián)制備的牛頸靜
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