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1、 本課題分別采用腫瘤標(biāo)志物和液基細(xì)胞學(xué)檢查系統(tǒng)(LCT),探討在肺癌患者胸水及痰液中的臨床應(yīng)用價(jià)值。 方法:收集肺癌組胸水66例,非肺癌組胸水35例,肺癌101例痰液標(biāo)本作為研究對(duì)象。選取其中的82例用于細(xì)胞芯片檢測(cè),51例進(jìn)行透射電鏡觀察。將痰液倒入含有CytoRich保存液的小瓶中,每一體積痰液混合相同體積的CytoRich保存液;在上述混合液中每10ml加入1ml粘液溶解液,混合后放置30分鐘,再將混合液在震蕩器上震動(dòng)1
2、0秒鐘,如混合液中仍有凝結(jié),可再增加一些粘液溶解液,直至粘液溶解。然后進(jìn)行蛋白定量、蛋白印跡(包括蛋白質(zhì)濃度測(cè)定、灌膠、制樣、電泳、轉(zhuǎn)膜、染色、雜交、ECL反應(yīng)及洗片)測(cè)定,并制作細(xì)胞芯片:包括點(diǎn)樣、封閉、雜交、固定及染色。最后進(jìn)行透射電鏡和LCT痰檢:包括粘液溶解、離心、震蕩、制片及鏡檢。 研究表明: CEA蛋白定量和蛋白印跡、細(xì)胞芯片及透射電鏡聯(lián)合應(yīng)用對(duì)肺癌患者胸水的診斷及鑒別診斷具有重要的臨床應(yīng)用前景。LCT在痰液制片、染色
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