強(qiáng)心苷類化合物抗腫瘤作用及機(jī)制.pdf

1、目的:研究強(qiáng)心苷類化合物(洋地黃毒甙、地高辛、西地蘭)抗腫瘤作用及機(jī)制。
　　方法:體外培養(yǎng)人腫瘤細(xì)胞株 HepG2、NCI-H460、SGC-7901、SW480、T24和人正常肝細(xì)胞 HL-7702,采用 MTT法檢測(cè)強(qiáng)心苷類化合物對(duì)六種細(xì)胞株增殖的影響;應(yīng)用熒光染色( Hoechst33258)方法觀察西地蘭處理 HepG2細(xì)胞形態(tài)的變化;使用鈉鉀ATP酶(Na+/K+-ATPase)檢測(cè)方法研究西地蘭對(duì) HepG2細(xì)胞 N

2、a+/K+-ATPase酶活性的影響;采用流式細(xì)胞儀 Propidium Iodide(PI)單標(biāo)法檢測(cè)西地蘭對(duì) HepG2細(xì)胞周期進(jìn)程的影響。建立 H22小鼠皮下移植瘤模型并研究西地蘭體內(nèi)抗腫瘤的作用。
　　結(jié)果:強(qiáng)心苷類化合物對(duì)人正常肝細(xì)胞 HL-7702顯示出較低的毒性,對(duì)五種腫瘤細(xì)胞的增殖存在不同程度的影響。熒光染色(Hoechst33258)法細(xì)胞形態(tài)學(xué)結(jié)果顯示西地蘭作用HepG2細(xì)胞1h,6h,12h后可見典型的凋亡形

3、態(tài)學(xué)改變,表現(xiàn)為部分細(xì)胞胞質(zhì)縮小,胞質(zhì)濃縮,核染色體高度凝聚、邊緣化,細(xì)胞核碎裂呈碎片狀,可見典型的新月形凋亡小體,而正常對(duì)照組的細(xì)胞核完整。Na+/K+-ATPase檢測(cè)結(jié)果表明,西地蘭可抑制 HepG2細(xì)胞Na+/K+-ATPase活性,與PBS組酶活性有顯著性差異(P<0.05),并呈劑量依賴性;隨著時(shí)間的增加,西地蘭對(duì) Na+/K+-ATPase活性抑制作用增強(qiáng),具有顯著性差異(P<0.05)。相同五個(gè)濃度的西地蘭對(duì)HL-770

4、2細(xì)胞Na+/K+-ATPase活性沒有明顯影響(P>0.05)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,西地蘭阻滯HepG2細(xì)胞于G1期(p<0.05)。西地蘭體內(nèi)抗腫瘤實(shí)驗(yàn),西地蘭組與西地蘭+PBS組的腫瘤均比對(duì)照組有所縮小,其中,西地蘭+PBS組對(duì)。而對(duì)照組的腫瘤體積呈曲線上升趨勢(shì)。瘤實(shí)驗(yàn)的實(shí)體瘤療效判定標(biāo)準(zhǔn)為40％。西地蘭+PBS組的抑瘤率高達(dá)48.43%,該組與對(duì)照組相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05).
　　結(jié)論:強(qiáng)心苷類化合物可