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文檔簡介
1、實驗一 抗粘附藥物對結(jié)腸癌術(shù)后肝轉(zhuǎn)移的干預作用 目的:探討術(shù)后早期給予抗粘附藥物丹參、蛇毒對結(jié)腸癌術(shù)后預防肝轉(zhuǎn)移的效果及對癌細胞表面ICAM-1表達的影響.方法采用4~5周齡Balbc/c裸鼠24只,體重17~20g,置SPF(specific pathogen free condition)級條件下飼養(yǎng).按體重大小編號,成組設(shè)計,隨機分為4組,每組6只,于建立模型前2日腹腔內(nèi)給藥,每日一次,共3周,實驗組分別自腹腔注射丹參0.7ml/
2、只、蛇毒3.125×10<'-2>單位/只、丹參0.7ml和蛇毒3.125×10<'-2>單位/只,以上藥物均用生理鹽水調(diào)整至1.4ml.對照組腹腔注射生理鹽水1.4ml.人結(jié)腸癌細胞株LS174T懸于RPMI1640培養(yǎng)液中,置細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng).取對數(shù)生長期細胞調(diào)整濃度約為1×10<'7>個/ml.無菌條件下以1%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉裸鼠,縱切口入腹,結(jié)扎脾胃韌帶,從脾下極進針,于脾被膜下緩慢注射癌細胞懸液0.1ml,關(guān)腹.5周時處
3、死小鼠,觀察原位移植瘤生長情況、肝轉(zhuǎn)移情況,計數(shù)各肝臟表面轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù),并經(jīng)病理組織學證實.取新鮮肝轉(zhuǎn)移癌結(jié)節(jié),制成細胞懸液并調(diào)整濃度為1×10<'6>個/ml,加入ICAM-1-FITC工作液上流式細胞儀檢測肝轉(zhuǎn)移癌結(jié)節(jié)細胞表面ICAM-1的表達.肝臟表面轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)采用秩和檢驗、ICAM-1的表達采用方差分析、肝轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)與肝轉(zhuǎn)移癌結(jié)節(jié)細胞表面ICAM-1的表達采用直線相關(guān)分析.結(jié)論:抗粘附藥物可減少肝轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)目,有效干預實驗性結(jié)腸癌
4、的轉(zhuǎn)移,其機制可能與降低癌細胞表面ICAM-1的表達,阻止細胞粘附有關(guān).抗粘附治療可能是防治腫瘤轉(zhuǎn)移的一個新方向.實驗二 丙氨?!劝滨0穼θ私Y(jié)腸癌細胞株增殖活性的影響 目的:研究丙氨酰-谷氨酰胺(Ala-Gln)對人結(jié)腸癌細胞株增殖活性的影響.方法:經(jīng)體外培養(yǎng)結(jié)腸癌細胞,加入不同濃度的丙氨酰-谷氨酰胺后收集細胞,應用流式細胞技術(shù),檢測癌細胞的細胞周期及凋亡情況.結(jié)論:在一定濃度范圍內(nèi),丙氨酰-谷氨酰胺可減少結(jié)腸癌細胞的凋亡,促進G<,
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