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文檔簡介
1、第一部分:
偶聯(lián)C225的Fe3O4/Ag復合納米顆粒表征及其對人鼻咽癌細胞放射增敏作用初步研究
[背景與目的]:
放射治療是惡性腫瘤的重要治療手段之一。隨著放療設備、影像及計算機技術等快速發(fā)展,出現(xiàn)了影像引導下的放射治療(IGRT)。但臨床上至今仍未有理想經(jīng)影像介導的IGRT的特異性示蹤劑,如何增加腫瘤放射的敏感性也一直是腫瘤放射治療領域中倍受關注的問題。本研究旨在構建新型多功能復合納米顆粒,
2、可同時作為惡性腫瘤的MRI示蹤劑、放射線的增敏劑以及抗腫瘤制劑。
[方法]:
制備Fe3O4/Ag/C225,并表征透射電子顯微鏡(TEM),能量彌散X射線光譜儀(Energy-dispersiveX-rayspectroscopy,EDS),紫外吸收光譜和動態(tài)光散射(DLS)表征復合納米顆粒Fe3O4/Ag/C225;ELISA法檢測偶聯(lián)抗體西妥昔單抗(cetuximab,C225)在復合納米顆粒Fe3O4
3、/Ag中的活性保存度;光鏡下觀察人鼻咽癌腫瘤細胞系(CNEs)在不同濃度Fe3O4/Ag/C225的形態(tài)學改變;MTT比色法初步檢測Fe3O4/Ag/C225復合納米顆粒檢測其抑制CNEs生長抑制效果;流式細胞術檢測CNE在不同濃度下Fe3O4/Ag/C225的凋亡情況;磁共振(MRI)下觀測Fe3O4/Ag/C225成像情況;克隆形成實驗檢測Fe3O4/Ag/C225復合納米顆粒聯(lián)合X-ray作用下CNE克隆形成能力;WesternB
4、lot法檢測Fe3O4/Ag/C225聯(lián)合X-ray后EGFR蛋白表達。
[結果]:
TEM示復合納米顆粒Fe3O4/Ag/C225顯示復合材料表征;能量色散X射線光譜儀(EDS)及紫外吸收光譜可見Fe和Ag的特征峰;紫外吸收光譜(UV)和動態(tài)光散射(DLS)檢測顯示偶聯(lián)C225后的特征;ELISA檢測證實在復合納米顆粒Fe3O4/Ag/C225上C225保持度大于80%;光鏡下觀察及MTT法檢測均提示復合納
5、米顆粒Fe3O4/Ag/C225對鼻咽癌腫瘤細胞有明顯抑制作用;根據(jù)MTT結果計算,24h和48hIC50分別為350.49±3.14μg/ml和262.53±4.47μg/ml;流式細胞術檢測CNE在不同濃度下Fe3O4/Ag/C225的凋亡明顯增加;克隆形成實驗顯示Fe3O4/Ag/C225復合納米顆粒增強了CNE的放射線敏感性,增敏比(SER)達2.262倍;WesternBlot法檢測提示Fe3O4/Ag/C225聯(lián)合X-ray
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