硒鹽對黑斑蛙蝌蚪（Rana nigromaculata）毒性效應(yīng)的研究.pdf

1、本研究以黑斑蛙(Rananigromaculata)蝌蚪為實(shí)驗(yàn)對象，研究了不同質(zhì)量濃度的Na2SeO4和Na2SeO3對黑斑蛙蝌蚪的毒性效應(yīng)，以期揭示其毒性的機(jī)理，補(bǔ)充環(huán)境污染監(jiān)測方法和生物標(biāo)志物，也為保護(hù)兩棲動物提供科學(xué)依據(jù)并對兩棲動物的養(yǎng)殖等提供病理等參考依據(jù)。 環(huán)境背景值分析。對環(huán)境水與實(shí)驗(yàn)用水采用濕法消解原子熒光光度法測定硒含量、采用高效毛細(xì)管電泳測定了四種陽離子濃度，保證了實(shí)驗(yàn)精確性。Na2SeO4和Na2SeO3對黑

2、斑蛙蝌蚪急性毒性實(shí)驗(yàn)。Na2SeO4和Na2SeO3對黑斑蛙29～30蝌蚪的96h半致死濃度為94.8mg/L和33.5mg/L。結(jié)果顯示，兩種硒鹽對黑斑蛙具有較強(qiáng)的致死作用，并呈現(xiàn)一定的劑量-效應(yīng)關(guān)系。 Na2SeO4和Na2SeO3對黑斑蛙蝌蚪肝臟組織的損傷。肝臟石蠟切片，HE染色。損傷表現(xiàn)為肝細(xì)胞集化、肝血竇增加并擴(kuò)大，明顯特征是出現(xiàn)已經(jīng)吞噬異常肝細(xì)胞的枯否細(xì)胞(Kupffercells，KC)。激活的枯否細(xì)胞數(shù)量隨著染毒

3、濃度的升高，Na2SeO4組呈現(xiàn)正相關(guān)，具有良好劑量-效應(yīng)關(guān)系，而Na2SeO3組呈現(xiàn)先升高后降低趨勢。 Na2SeO4和Na2SeO3對紅細(xì)胞的損傷。導(dǎo)致紅細(xì)胞產(chǎn)生微核及核異常，Na2SeO4暴露染毒組核異常主要表現(xiàn)為核固縮與核裂解，Na2SeO3暴露染毒組則主要表現(xiàn)為核固縮和核內(nèi)凹。微核率和各項(xiàng)核異常率出現(xiàn)高峰的濃度并不完全同步，各指標(biāo)總體表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢。 Na2SeO4和Na2SeO3的遺傳毒性。應(yīng)用瓊脂

4、糖凝膠電泳技術(shù)檢測了Na2SeO4和Na2SeO3對蝌蚪基因組DNA的斷裂損傷。DNA受損越嚴(yán)重，產(chǎn)生的斷片越多并且片斷越小，電泳時遷移動DNA量也就越大，遷移距離越長，對黑斑蛙蝌蚪基因組DNA造成不同程度的斷裂損傷。 建立了測定兩棲動物組織中還原型谷胱甘肽的含量的反相高效液相色譜法(RP-HPLC)。采用本法測定黑斑蛙蝌蚪在Na2SeO4和Na2SeO3不同濃度不同時間暴露染毒下機(jī)體GSH含量，硒鹽對蝌蚪GSH的誘導(dǎo)使其變化具