龍鉆通痹方對(duì)實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎大鼠模型血清IL-4、IL-10的影響.pdf

1、目的:觀察龍鉆通痹方對(duì)實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎大鼠模型血清IL-4、IL-10的影響,探討龍鉆通痹方治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)理。
　　方法:60只Wistar雄性大鼠,隨機(jī)取10只為正常對(duì)照組外,剩余大鼠造模,方法如下:在無菌條件下,用0.1mol/L冰醋酸充分溶解牛II型膠原蛋白,與等體積弗氏不完全佐劑(1mg2mL-1)混合、震蕩充分乳化,制成CII乳劑,試驗(yàn)時(shí)于每只大鼠頸、背部多點(diǎn)皮內(nèi)注射0.25ml致炎,于14d后按上述方法和劑量再次

2、免疫。造模成功后分5組:①生理鹽水陰性對(duì)照組(n=8);②甲氨蝶呤組(n=8);③龍鉆通痹方高劑量組(n=9);④龍鉆通痹方中劑量組(n=9);⑤龍鉆通痹方低劑量組(n=9)。第15天開始給藥,生理鹽水陰性對(duì)照組予生理鹽水2ml/100g灌胃,每日1次;甲氨蝶呤組灌服甲氨蝶呤藥液2.7mg2kg-1(為70kg成人臨床用藥3倍),每只灌服約0.405mg,每周灌服1次;龍鉆通痹方高、中、低劑量組(含生藥16,8,4g/kg)2mL/10

3、0g,灌胃,每日分2次進(jìn)行每次約2ml/只;正常組自由飲水。以甲氨蝶呤作對(duì)照,觀察大鼠的關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)及體重增加值的變化,采用放射酶連免疫法檢測(cè)各組大鼠血清IL-4、IL-10水平,并取關(guān)節(jié)滑膜組織做病理切片觀察炎性變化。采用SPSS16.0對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,所有數(shù)據(jù)以x± s表示,不同組間用重復(fù)方差分析。
　　結(jié)果:(1)實(shí)驗(yàn)性大鼠關(guān)節(jié)腫脹結(jié)果:大鼠平均關(guān)節(jié)炎指數(shù)在第12d最高,然后逐漸消退,第21d減到最輕,然后又逐漸腫脹,第

4、35d出現(xiàn)第2個(gè)炎癥高峰。第56d大鼠平均關(guān)節(jié)炎指數(shù)計(jì)分統(tǒng)計(jì),龍鉆通痹方高、中劑量組、甲氨蝶呤組均能明顯抑制大鼠關(guān)節(jié)腫脹,與模型對(duì)照組相比有顯著性差異(P<0.01),龍鉆通痹方高劑量組與甲氨蝶呤對(duì)照組相比有顯著性差異(P<0.05)。龍鉆通痹方中劑量組與甲氨蝶呤對(duì)照組相比無顯著性差異(P>0.05)。(2)實(shí)驗(yàn)性大鼠體重增加結(jié)果:①致炎前各組體重?zé)o明顯差異(P>0.05);②第35天與致炎前相比,模型對(duì)照組、各治療組的體重增加明顯低于

5、正常對(duì)照組(P<0.05);龍鉆通痹方高劑量組體重明顯高于模型對(duì)照組、甲氨蝶呤組(P<0.01)。③第56天龍鉆通痹方高劑量組與正常對(duì)照組相比均無顯著性差異(P>0.05)。(3)血清IL-4在各組的表達(dá)水平:①正常組、甲氨蝶呤組、龍鉆通痹方高劑量組、龍鉆通痹方中劑量組IL-4水平的表達(dá)均高于模型組(P<0.01);②龍鉆通痹方高劑量組與甲氨蝶呤組相比有顯著差異性(P<0.05);③甲氨蝶呤組、龍鉆通痹方中劑量組、龍鉆通痹方低劑量組,均

6、可提高IL-4,差異無顯著性(P>0.05)。(4)血清IL-10在各組的表達(dá)水平:①正常組、甲氨蝶呤組、龍鉆通痹方高劑量組、龍鉆通痹方中劑量組IL-10水平的表達(dá)均高于模型組(P<0.01,或 P<0.05);②龍鉆通痹方高劑量組與甲氨蝶呤組相比差異有顯著性(P<0.05);龍鉆通痹方中劑量組與甲氨蝶呤組相比差異無顯著性(P>0.05);③龍鉆通痹方低劑量組與甲氨蝶呤組相比差異有顯著性(P<0.05)。(5)實(shí)驗(yàn)性大鼠關(guān)節(jié)滑膜病理結(jié)果

7、:①正常關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)和滑膜細(xì)胞,其由滑膜層有1-3層滑膜細(xì)胞組成,滑膜下細(xì)胞數(shù)量較少。其下無炎細(xì)胞浸潤(rùn),可見疏松結(jié)締組織及毛細(xì)血管。②模型組滑膜細(xì)胞異常增殖最明顯;新生的毛細(xì)血管及纖維結(jié)締組織增生,機(jī)化使滑膜成不規(guī)則肥厚,并形成了許多小絨毛狀的突起。有大量淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞及單核細(xì)胞浸潤(rùn),病理積分與正常對(duì)照組積分比較有顯著差異(P<0.01)。③甲氨蝶呤組、龍鉆通痹方高劑量組、龍鉆通痹方中劑量組、龍鉆通痹方低劑量組病變程度均有不同程度的減輕: