應(yīng)用組織芯片技術(shù)檢測(cè)CD44v6和Ezrin蛋白在子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)及意義.pdf

1、背景與目的：子宮內(nèi)膜癌是婦科常見三大惡性腫瘤之一，發(fā)病率近年來呈上升趨勢(shì)，但其發(fā)病機(jī)制仍不十分明了，預(yù)后仍不滿意，因此對(duì)其進(jìn)行病因研究，尋找新的治療方法以改善預(yù)后非常重要。 CD44是細(xì)胞表面的跨膜糖蛋白，是介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與基質(zhì)間相互作用的粘附分子，廣泛存在于白細(xì)胞、上皮細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞上。其中CD44v6因有組織的特異性，在近幾年倍受關(guān)注。研究認(rèn)為CD44v6能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)的粘附，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞向基

2、質(zhì)侵襲，從而影響腫瘤細(xì)胞的遷移和運(yùn)動(dòng)能力。Ezrin蛋白為膜細(xì)胞骨架連接蛋白，參與了微絨毛的形成并與細(xì)胞形態(tài)的維持、運(yùn)動(dòng)、黏附及生存有關(guān)。Ezrin蛋白在許多腫瘤組織中都高表達(dá)，通過信號(hào)途經(jīng)，與黏附分子、細(xì)胞因子等的作用參與了腫瘤的發(fā)生、轉(zhuǎn)移，也有很多研究闡明了Ezrin蛋白表達(dá)水平或免疫反應(yīng)性與腫瘤生物學(xué)行為及預(yù)后的相關(guān)性。 本文研究CD44v6和Ezrin在不同類型子宮內(nèi)膜中的表達(dá)情況，探討其在子宮內(nèi)膜癌發(fā)病機(jī)制中的意義。

3、 方法：收集2000年～2007年間在溫州醫(yī)學(xué)院附屬二院婦產(chǎn)科子宮切除或診斷性刮宮的子宮內(nèi)膜標(biāo)本，選取其中子宮內(nèi)膜癌58例，子宮內(nèi)膜不典型增生30例，子宮內(nèi)膜單純性增生及復(fù)雜性增生共20例，正常增生期子宮內(nèi)膜20例，所有患者術(shù)前未接受過任何輔助治療，如放療，化療或激素治療。所有標(biāo)本術(shù)后經(jīng)HE方法染色診斷并分組。采用組織芯片技術(shù)及免疫組織化學(xué)方法(EnVision法)檢測(cè)和分析CD44v6和Ezrin在上述患者的子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)

4、情況。 結(jié)果： (1)CD44v6在正常增生期子宮內(nèi)膜，單純、復(fù)雜性增生，不典型增生及子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)比較CD44v6主要定位于子宮內(nèi)膜上皮的細(xì)胞膜，部分位于細(xì)胞漿。CD44v6蛋白在正常增生期子宮內(nèi)膜，單純、復(fù)雜性增生，不典型增生及子宮內(nèi)膜癌中的陽性率分別為10.00％(2/20)、40.00％(8/20)、66.67％(20/30)及79.03％(46/58)，陽性表達(dá)逐漸升高，差異有顯著性(H=33.23，P

5、＜0.05)。組間比較則顯示正常子宮內(nèi)膜組與不典型增生及子宮內(nèi)膜癌組之間差異顯著(P＜0.01)；子宮內(nèi)膜癌組與子宮內(nèi)膜單純、復(fù)雜性增生組間有顯著性差異(P＜0.05)；而子宮內(nèi)膜癌組，不典型增生組兩組間比較則差異不顯著(P＞0.05)。 (2)CD44v6表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系CD44v6表達(dá)強(qiáng)度與子宮內(nèi)膜癌手術(shù)分期及有無伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，差異有顯著性(P＜0.01)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和手術(shù)分期晚期者CD44v6高表達(dá)。

6、CD44v6表達(dá)在子宮內(nèi)膜腺癌分化程度、肌層浸潤(rùn)組參數(shù)比較差異均無顯著性(P＞0.05)。 (3)Ezrin在正常增生期子宮內(nèi)膜，單純、復(fù)雜性增生，不典型增生及子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)Ezrin主要表達(dá)在不典型增生和內(nèi)膜癌細(xì)胞的細(xì)胞漿以及細(xì)胞膜內(nèi)。Ezrin蛋白在正常增生期子宮內(nèi)膜，單純、復(fù)雜性增生，不典型增生及子宮內(nèi)膜腺癌中的陽性率分別為15.00％(3/20)、25.00％(5/20)、46.67％(14/30)及81.03％

7、(47/58)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示四組之間比較采用差異有顯著性(H=40.27，P＜0.05)。子宮內(nèi)膜癌與正常子宮內(nèi)膜增生期組，單純、復(fù)雜性增生組，不典型增生組比較，差異有顯著性(P＜0.05)；單純、復(fù)雜性增生組與正常子宮內(nèi)膜增生期組比較沒有顯著差異(P＞0.05)；不典型增生與正常子宮內(nèi)膜增生期組比較，差異有顯著性(P＜0.05)。 (4)Ezrin表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系58例子宮內(nèi)膜癌中Ezrin表達(dá)與患者的臨床

8、分期，組織學(xué)類型，有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無明顯相關(guān)(P＞0.05)，但與浸潤(rùn)肌層的深度有關(guān)。深肌層浸潤(rùn)組的Ezrin表達(dá)強(qiáng)于無肌層浸潤(rùn)及淺肌層浸潤(rùn)組，顯示兩組間有顯著性差異(P＜0.05)。 (5)CD44v6表達(dá)與Ezrin表達(dá)的相互關(guān)系用Spearman等級(jí)相關(guān)分析CD44v6蛋白與Ezrin蛋白的關(guān)系，rs=0.40，P＜0.05，二者呈顯著正相關(guān)，CD44v6含量隨Ezrin含量增加而呈上升趨勢(shì)，提示CD44v6蛋白的含量與Ez

9、rin蛋白含量有關(guān)。 結(jié)論： (1)CD44v6的陽性過表達(dá)能夠及早發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜癌的癌前病變，間接反應(yīng)了子宮內(nèi)膜癌的惡性程度及其浸潤(rùn)能力，說明CD44v6的表達(dá)參與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生，發(fā)展過程。 (2)Ezrin的過度表達(dá)與子宮內(nèi)膜異常增生及惡變有關(guān)，同時(shí)與子宮內(nèi)膜癌的較早期惡性行為-局部肌層侵襲有關(guān)。Ezrin可作為判斷子宮內(nèi)膜癌上皮惡性轉(zhuǎn)化的一項(xiàng)重要指標(biāo)，對(duì)早期診斷子宮內(nèi)膜癌具有一定的指導(dǎo)意義。 (3)