生命早期補(bǔ)充維生素D對哮喘模型影響的研究.pdf

1、維生素D 是人體必需的重要營養(yǎng)素，目前口服補(bǔ)充維生素D 已經(jīng)被現(xiàn)代醫(yī)學(xué)廣泛用來預(yù)防佝僂病。然而維生素D 對免疫系統(tǒng)的影響尚未引起人們足夠的重視。Litonjua等在2007年提出維生素D 缺乏是導(dǎo)致哮喘等過敏性疾病增加的原因之一。由于需要滿足胎兒和新生兒對維生素D的需要，妊娠和泌乳期婦女容易發(fā)生維生素D 缺乏，她們體內(nèi)的維生素D 狀況會影響自身及后代。因此生命早期(孕期及泌乳期)補(bǔ)充維生素D 對哮喘等過敏性疾病的研究非常必要。

2、研究目的：本實驗旨在研究大鼠生命早期(孕期及泌乳期)補(bǔ)充不同劑量的維生素D 對其哮喘模型氣道高反應(yīng)性及炎癥的影響，并探討其作用機(jī)制。為臨床合理使用維生素D 防治哮喘等特應(yīng)性疾病提供理論依據(jù)。 研究方法：選用性成熟、體重在170～250g的雌性Wistar 大鼠共32 只。隨機(jī)分為4組:對照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組各8 只。 各組于動情前期與有生育能力的雄性大鼠(200～250g) 按2∶1 比例合籠,次日晨進(jìn)行陰

3、道涂片檢查,以發(fā)現(xiàn)精子的當(dāng)天為受孕的第1天。于受孕第7天起以灌胃的方式給予各組大鼠不同劑量的1,25(OH)2D3，直到子代大鼠生后21天離乳為止。對照組以PBS代替。子代大鼠離乳后，再從每組中隨機(jī)取出8 只，雌雄各半，用卵清蛋白作為致敏原制備哮喘大鼠模型。應(yīng)用動物肺功能儀測定各組大鼠的氣道阻力和肺順應(yīng)性，測定支氣管肺泡灌洗液（BLAF）細(xì)胞總數(shù)及嗜酸性細(xì)胞計數(shù)，制備肺組織病理切片觀察炎癥變化。用ELISA 檢測法測定血清及BLAF 中

4、的IL-10 水平，免疫組化染色方法檢查肺組織中ICAM-1的表達(dá)并觀察ICAM-1 在氣道組織中的分布。 研究結(jié)果：（1）肺功能：低劑量組[（0.88±0.14cmH2O/(ml·s),P<0.05]和中劑量組大鼠[（0.72±0.06）cmH2O/(ml·s)，P<0.05）]氣道阻力均低于對照組[（1.11±0.07）cmH2O/(ml·s)]，高劑量組大鼠氣道阻力[（2.01±0.07）cmH2O/(ml·s)]顯著高于

5、對照組（P<0.05）。同時低劑量組大鼠肺順應(yīng)性[（14.68±1.42）ml/cmH2O]較中劑量組[（20.80±1.37）ml/cm H2O]顯著降低（P<0.05）,但二者氣道阻力的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。（2）BALF 中嗜酸性粒細(xì)胞計數(shù)(×104)：與對照組（1.196±0.304）比較，高劑量組（2.200±0.603）無顯著性變化（P>0.05），中劑量組（0.492±0.203）和低劑量組（0.840±0.2

6、23）均顯著降低（P<0.05）,但中劑量組和低劑量組比較無顯著性差異。（3） 肺組織病理變化：與對照組相比，低劑量組和中劑量組氣道炎癥和嗜酸性粒細(xì)胞浸潤減輕,而高劑量組明顯加重。（4）血清及BALF 中IL-10濃度：血清中，與對照組[(18.673±4.673)pg/ml]相比，低劑量組[(30.171±2.768)pg/ml]和中劑量組[(51.535±6.601)pg/ml]IL-10 濃度均顯著增高（P<0.05）,且

7、中劑量組較低劑量組顯著增高（P<0.05）。 而高劑量組[(15.400±3.521)pg/ml]無顯著性變化(P>0.05)；BALF 中，與對照組[(59.065±14.446)pg/ml]相比，低劑量組[(58.063±3.413)pg/ml] 無顯著性變化(P>0.05)，中劑量組[(90.035±14.301)pg/ml]IL-10 濃度顯著升高（P<0.05）,高劑量組[(45.305±6.456)pg/ml]顯著降