活性維生素D3對糖尿病腎病大鼠維生素D受體和腎臟纖維化因子的影響.pdf

1、目的:探討活性維生素D3(vitamin D receptor，VDR)在糖尿病腎病(diabeticnephropathy，DN)中對維生素D受體及腎臟纖維化的作用及可能機制。
　　方法:遺過一次性腹腔注射鏈脲菌素(streptozotocin，STZ)誘導(dǎo)建立DN大鼠模型。用腎臟原位注射的方法，注射不同類型TGF-β1慢病毒，建立腎臟不同TGF-β1表達的動物模型。DN大鼠(n=36)分為6組:①TGF-β1過表達+花生油組6

2、只;②TGF-β1過表達+維生素D組6只;③干擾TGF-β1+花生油組6只，④干擾TGF-β1表達+花生油組6只;⑤空載體慢病毒+花生油組6只，⑥空載體慢病毒+維生素D組6只。分別給予活性維生素D3或花生油（對照）灌胃37天，后全部處死取腎臟組織。用電鏡及光鏡觀察各組腎臟組織形態(tài)變化;實時熒光定量PCR(real-time PCR)及western蛋白印跡實驗檢測各組轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth facto

3、r，TGF-β1)、維生素D受體(vitaminD receptor，VDR)、單核細胞趨化因子(moynocte chemoattractantprotein-1，MCP-1)、膠原蛋白-l(collagen-1，Col-1) mRNA及蛋白表達量的變化。
　　結(jié)果:(1)不同類型TGF-β1慢病毒可使腎臟有不同TGF-β1表達水平;即TGF-β1過表達病毒（TGF-β1高表達），干擾TGF-β1病毒（TGF-β1低表達），空載

4、體病毒（TGF-β1正常表達）。(2)腎臟組織用電鏡、馬森染色及免疫組化光鏡檢查結(jié)果顯示，TGF-β1 mRNA及蛋白表達量越高，腎臟病理變化越嚴重;活性維生素D3干預(yù)后腎臟纖維化減輕。(3)實時熒光定量PCR及western蛋白印跡檢測提示:與空病毒+花生油組對比，過表達十花生油組TGF-β1、MCP-1、Col-1 mRNA及蛋白表達水平明顯上調(diào)，VDR表達水平明顯下調(diào)（均P＜0.05）;干擾+花生油組TGF-β1、MCP-1、Co