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文檔簡介
1、背景和目的:食管癌是世界上最常見的六大惡性腫瘤之一,其死亡率居惡性腫瘤死亡率的前十位,全世界每年約有20萬人死于食管癌。因此,研究和尋找食管癌早期診斷、預后判斷的客觀指標具有重要的理論意義和應用價值。在凋亡相關(guān)基因與食管癌的關(guān)系方面,目前研究多局限于食管鱗癌,而同時研究凋亡相關(guān)基因與食管鱗癌、腺樣結(jié)構(gòu)癌和小細胞癌在國內(nèi)外尚未見報道。本研究采用免疫組織化學和激光共聚焦顯微鏡技術(shù)檢測食管癌、癌旁粘膜組織和不同類型的食管癌組織 PTEN、MG
2、MT、Survivin和IPO-38蛋白的表達情況,旨在探討上述四種蛋白的表達與食管癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系,為食管癌的早期診斷及預后判斷提供分子生物學指標。
方法:
1.研究對象
?、偈占?001.11~2005.7期間汕頭大學醫(yī)學院病理學教研室收檢的食管癌手術(shù)切除標本存檔蠟塊85例,其中27例帶有癌旁組織。
?、谑占?004.7~2005.7期間汕頭大學醫(yī)學院病理學教研室收檢的新鮮食管癌手術(shù)切除標本20
3、例。
2.HE染色:用以確定組織形態(tài)及病理學診斷。
3.免疫組織化學方法:采用免疫組織化學染色方法(EnVision二步法)檢測85例食管癌及其癌旁粘膜組織中PTEN、MGMT、Survivin和IPO-38蛋白的表達情況。
4.激光共聚焦顯微鏡觀察:采用激光共聚焦顯微鏡觀察20例食管癌組織中PTEN和MGMT蛋白表達定位情況,并進行定量分析,分析上述兩種蛋白表達與食管癌分化程度的關(guān)系。
結(jié)果:<
4、br> 1.組織病理學:比較鱗狀細胞癌、腺樣結(jié)構(gòu)癌和小細胞癌組織的浸潤深度情況,僅在鱗狀細胞癌和腺樣結(jié)構(gòu)癌組間差異有顯著性(P<0.05)。小細胞癌組的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率明顯高于鱗狀細胞癌組(P<0.05)。
2.免疫組織化學
2.1.四種蛋白在食管不同病變組織中的表達
僅在單純性增生和食管浸潤癌組間發(fā)現(xiàn) PTEN表達陽性率的差別有顯著性(P=0.005)。單純性增生、非典型增生與食管癌組MGMT陽性表達均有顯
5、著性差異(P<0.05)。浸潤癌組和單純性增生組組間Survivin表達差異有顯著性(P=0.020),但IPO-38蛋白表達在各實驗組間沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
2.2.四種蛋白在不同類型食管癌組織中的表達
鱗癌、小細胞癌與腺樣結(jié)構(gòu)癌實驗組間PTEN表達均有顯著性差異(P<0.05)。與小細胞癌相比,鱗狀細胞癌和腺樣結(jié)構(gòu)癌組織中均出現(xiàn)明顯的MGMT蛋白高表達(P值均小于0.01)。Survivin表達僅在小
6、細胞癌組和腺樣結(jié)構(gòu)癌組間差異有顯著性(P=0.001),而IPO-38蛋白表達與食管癌的類型無關(guān)。
2.3.四種蛋白表達與食管鱗癌臨床病理特征的關(guān)系
高分化鱗癌組織中PTEN蛋白的陽性表達率明顯高于中分化鱗癌(P<0.05)。Survivin蛋白表達與腫瘤浸潤深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05),而與鱗癌分化程度無關(guān)。MGMT和IPO-38蛋白表達也與食管癌分化程度、浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)。
2.4.食管
7、癌組織中四種蛋白表達的相關(guān)性分析
應用Pearson相關(guān)分析85例食管癌組織中四種蛋白表達的相關(guān)關(guān)系顯示:PTEN與MGMT蛋白表達呈明顯正相關(guān)(r=0.231,P<0.05),Survivin與IPO-38蛋白表達呈明顯正相關(guān)(r=0.878,P<0.01);PTEN與Survivin蛋白表達呈明顯負相關(guān)(r=-0.235,P<0.05)。
3.激光共聚焦顯微鏡
MGMT蛋白陽性信號位于細胞核和/或細胞漿
8、,呈顆粒狀分布;PTEN蛋白則僅僅位于細胞核,呈塊狀或片狀分布。與中分化鱗癌組織的PTEN蛋白表達的量比較,高分化鱗癌組織明顯升高,t=3.053,P<0.01。MGMT蛋白表達與食管癌分化程度無關(guān)。
結(jié)論:
1.PTEN、Survivin和MGMT蛋白表達的變化可能與食管癌的發(fā)生有關(guān),是食管癌發(fā)生的早期分子指標。
2.PTEN和Survivin蛋白表達可能與食管癌的分化和預后有關(guān)。
3.聯(lián)合檢測
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