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文檔簡介
1、目的:檢測糖尿病患者及糖尿病腎病不同階段患者血清晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)水平及蛋白質(zhì)羰基(PCO)含量,以評價(jià)蛋白氧化損傷的程度,同時(shí)檢測血清基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)的表達(dá)水平和活性,分析糖尿病腎病患者蛋白氧化損傷與血清MMP-2的相關(guān)性,探討蛋白氧化損傷程度的加重及蛋白氧化損傷產(chǎn)物的積累對腎臟MMPs的影響,從而推斷蛋白氧化損傷在糖尿病腎病發(fā)病中的可能機(jī)制。 方法:從住院患者中選取60例糖尿病患者,根據(jù)24小時(shí)尿白
2、蛋白定量分為單純糖尿病組(DM組,尿白蛋白<30mg/24h)、早期糖尿病腎病組(DN1組,30≤尿白蛋白≤300mg/24h)、糖尿病腎病組(DN2組,尿白蛋白>300mg/24h),并選取20例正常健康體檢者作為正常對照組(NC組),應(yīng)用改良后的Witko-Sarsat方法檢測血清AOPP水平,應(yīng)用2,4-二硝基苯肼比色法檢測PCO含量,應(yīng)用逆行追蹤免疫吸附法及明膠SDS-PAGE酶譜法分別檢測血清MMP-2的表達(dá)水平和活性,比較A
3、OPP、PCO水平以及血清MMP-2的表達(dá)水平和活性的組間差異,分析蛋白氧化損傷指標(biāo)與血清MMP-2的表達(dá)水平和活性的相關(guān)性,并對血清MMP-2的表達(dá)水平和活性的影響因素行多元逐步回歸分析。 結(jié)果: (1) 單純糖尿病組(DM)血清AOPP水平和PCO含量較正常對照組(NC)明顯升高,糖尿病腎病組(DN1、DN2)較DM組明顯升高,DN2組和DN1組比較,血清AOPP水平和PCO含量亦明顯升高,統(tǒng)計(jì)學(xué)上均有顯著性差異;
4、 (2) DM組和NC組比較,血清MMP-2的表達(dá)水平升高,活性增強(qiáng),DN1、DN2組較DM組血清MMP-2的表達(dá)水平升高,活性增強(qiáng),DN2組血清MMP-2表達(dá)水平和DN1組比較亦逐漸升高,統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異,DN2組血清MMP-2活性較DN1組亦升高,但統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著差異。 (3) Pcarson相關(guān)分析表明蛋白氧化損傷的指標(biāo)AOPP、PCO與血清MMP-2的表達(dá)水平和活性均呈正相關(guān)。 (4) 多元逐步回歸分析
5、表明PCO、AOPP為血清MMP-2表達(dá)水平的主要影響因素,HbAlC、AOPP、PCO為血清MMP-2活性的主要影響因素。 結(jié)論:在糖尿病腎病患者中,隨著蛋白氧化損傷程度的加重,血清MMP-2的表達(dá)和活性明顯上調(diào),提示MMP-2活性的改變可能與氧化應(yīng)激對MMPs的攻擊有一定關(guān)系,而且AOPP及羰基化蛋白等蛋白氧化損傷產(chǎn)物作為新的損傷因子直接影響了MMP-2的表達(dá)和活性,故尋求干預(yù)措施減輕氧化應(yīng)激對蛋白的影響,減少蛋白氧化損傷產(chǎn)
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