基質(zhì)金屬蛋白酶-9基因多態(tài)性與糖尿病腎病相關(guān)性研究.pdf

1、糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病(diabetes mellitus，DM)的慢性微血管并發(fā)癥，同時(shí)是糖尿病主要致死原因之一。DN在慢性腎功能衰竭的重要性，以及為社會帶來的巨大經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，使之越來越受到關(guān)注。DN的發(fā)病機(jī)制至今尚未完全闡明，除了環(huán)境因素外，遺傳因素已經(jīng)被證實(shí)是DN發(fā)生中重要的一環(huán)。根據(jù)流行病學(xué)及家系調(diào)查顯示，DN的發(fā)生發(fā)展具有遺傳易感性，故盡快尋找與DN發(fā)病相關(guān)的基因，對具有這類基因的高

2、?；颊哌M(jìn)行早期治療，以延緩糖尿病腎病的進(jìn)程，至關(guān)重要。 細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)合成和降解的失衡與DN病理過程密切相關(guān)?；|(zhì)金屬蛋白酶-9(Matrix Metalloproteinases-9，MMP-9)的主要生物學(xué)功能是參與ECM的降解和重建，在不同的DN個(gè)體及DN階段中，有酶轉(zhuǎn)錄和活性的變化。MMP-9基因定位于第20號染色體，這恰與DN基因連鎖分析中的定位相一致，故其被提出可作為D

3、N的候選基因。 目的： 1.探討中國南方漢族人群中MMP-9基因二核苷酸重復(fù)序列多態(tài)標(biāo)志ACn的分布情況。 2.探討MMP-9基因二核苷酸重復(fù)序列多態(tài)標(biāo)志ACn與糖尿病腎病的相關(guān)性。 3.探索糖尿病腎病的發(fā)病危險(xiǎn)因素。 方法： 應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-簡單序列長度多態(tài)性(PCR-SSLP)的方法，檢測391例中國南方漢族人群中MMP-9基因二核菅酸重復(fù)序列多態(tài)標(biāo)志ACn的分布情況。研究對象共分為

4、3組：正常對照組(非DM組)127例，糖尿病非腎病組(NDN組)132例，糖尿病腎病組(DN組)132例，對各組間等位基因頻率、基因型頻率等進(jìn)行比較分析。使用SPSS13.0 for Windows統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。 結(jié)果： 1.三組的MMP-9基因ACn多態(tài)性中共發(fā)現(xiàn)10種等位基因和22種基因型。ACn等位基因重復(fù)數(shù)目有13、15、16、1 8至24，其中以AC20等位基因最為常見。．AC20等位基因在正常對照組、

5、NDN組及DN組的分布頻率分別為：59.4％、54.5％、57.2％。中國人與日本人在MMP-9基因ACn等位基因頻率分布進(jìn)行比較，有顯著差別。正常對照組(非DM組)與2型DM組(NDN組+DN組)比較，各種等位基因的分布頻率差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。DN組與NDN組的AC21等位基因頻率比較，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=6.472，P=0.01)，DN組AC21等位基因頻率為7.2％，顯著低于NDN組的14％；而DN組與正常對照組

6、AC21等位基因頻率差別則無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。除AC21等位基因頻率在組間有差異外，余各等位基因頻率的組間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2.正常對照組、NDN組及DN組中共發(fā)現(xiàn)MMP-9基因ACn多態(tài)性存在22種基因型，其中以AC20／AC20純合子基因型最常見，它在正常對照組、NDN組及DN組的分布頻率分別為39.4％、28.8％、31.1％。三組問的總體基因型頻率分布無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(P>0.05)，但在攜帶A

7、C21等位基因的基因型(AC21／AC21+AC21／X)中，DN組與NDN組頻率分布的比較，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=5.312，P<0.05)，在DN組中AC21／AC21+AC21／X基因型頻率明顯降低；NDN組與正常對照組比較，差別也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=4.636，P<0.05)，NDN組AC21／AC21+AC21／X基因型頻率高于正常對照組；DN組與正常對照組比較，則無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(x2=0.017，P>0.05)。 3

8、.在攜帶AC21等位基因的基因型組(AC21／AC21+AC21／X；X代表非AC21等位基因)與非攜帶AC21等位基因的基因型組(X／X)間進(jìn)行DN患病率的比較，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=5.312，P<0.05)，說明攜帶AC21等位基因的基因型組比非攜帶AC21的基因型組的DN患病率降低，OR值為0.49(95％CI：0.26～0.90)。另外，AC21／X基因型組與X／X基因型組DN患病率的比較，差別也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=3.91

9、2，P<0.05)，AC21／X基因型組的DN患病率為38％，低于X／X基因型組的53.6％，OR值為0.53(95％CI：0.28～1.00)。而AC21／X組與AC21／AC21+AC21／X組的DN患病率比較，差別則無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=0.051，P>0.05)。 4.進(jìn)行Logistic回歸分析(Forward conditional法)，控制相關(guān)混雜因素后，可進(jìn)入回歸方程模型中的變量有：PBG、HBA1c、LDL-C、

10、HDL-C。結(jié)果顯示PBG、HBA1c、LDL-C的OR值分別是1.061、1.275、1.529，說明該因素是增加患DN優(yōu)勢的危險(xiǎn)因素；HDL-C的OR值為0.463，說明該因素是降低患DN優(yōu)勢的保護(hù)因素。 結(jié)論： 1.在中國南方漢族人群中MMP-9基因ACn多態(tài)性中共發(fā)現(xiàn)10種等位基因和22種基因型。ACn等位基因重復(fù)數(shù)目有13、15、16、18至24，其中以AC20等位基因、AC20／AC20純合子基因型最為常見。