HL-60細胞IRP-,2- mRNA、TfR mRNA、Fn mRNA的表達及其與腫瘤相關基因WT-,1- mRNA的關系研究.pdf

1、鄭州大學碩士學位論文HL60細胞IRPmRNA、TfRmRNA、FnmRNA的表達及其與腫瘤相關基因WTmRNA的關系研究姓名：張傳新申請學位級別：碩士專業(yè)：兒科學指導教師：劉玉峰20040526鄭州大學2004局研究生畢業(yè)論文HL60細胞IRP：mRNA，TfRmRNA、FnmRNA的表達；6之其。j胂癱相關幕斟WTlmRNA的關系科究作用。同時，探討HL60細胞中IRP2、TfR和Fn與腫瘤基因WTl的關系以揭示白血病細胞鐵代謝機制

2、以及鐵在白血病發(fā)生發(fā)展中的作用。方法按照實驗要求，將FoCl3或去鐵胺(Desfcrrioxamine，DFO)加入含有10％胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液中使HL60細胞處于缺鐵或富鐵的不同狀態(tài)下進行培養(yǎng)。實驗分為五組，即：FeCl320組和FeCl340組(培養(yǎng)液中FeCl3終濃度分別為20、40pmol／L)：DFO50組和DFO一100組(培養(yǎng)液中DFO終濃度分別為50、100扯mol／L)；對照組(培養(yǎng)液中不加入FeCl3和

3、DFO)。細胞培養(yǎng)后，分別于第12小時、24小時和48小時收集各組培養(yǎng)細胞，細胞總RNA的提取參照組織／細胞總RNA提取試劑盒要求進行，提取后液氮凍存。采用RTPCR半定量法測定IRP2mRNA、FnmRNA、TfRmRNA和WTlmRNA等指標的相對表達量結(jié)果1。IRP2mRNA：各實驗組之間IRP2mRNA的表達量變化不大，經(jīng)統(tǒng)計學處理，組間差異無統(tǒng)計學意義(F前曠1199P005)。細胞培養(yǎng)時間對IRP2mRNA的表達有影響，經(jīng)統(tǒng)