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1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文HL60細(xì)胞IRPmRNA、TfRmRNA、FnmRNA的表達(dá)及其與腫瘤相關(guān)基因WTmRNA的關(guān)系研究姓名:張傳新申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):兒科學(xué)指導(dǎo)教師:劉玉峰20040526鄭州大學(xué)2004局研究生畢業(yè)論文HL60細(xì)胞IRP:mRNA,TfRmRNA、FnmRNA的表達(dá);6之其。j胂癱相關(guān)幕斟WTlmRNA的關(guān)系科究作用。同時,探討HL60細(xì)胞中IRP2、TfR和Fn與腫瘤基因WTl的關(guān)系以揭示白血病細(xì)胞鐵代謝機(jī)制
2、以及鐵在白血病發(fā)生發(fā)展中的作用。方法按照實(shí)驗(yàn)要求,將FoCl3或去鐵胺(Desfcrrioxamine,DFO)加入含有10%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液中使HL60細(xì)胞處于缺鐵或富鐵的不同狀態(tài)下進(jìn)行培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)分為五組,即:FeCl320組和FeCl340組(培養(yǎng)液中FeCl3終濃度分別為20、40pmol/L):DFO50組和DFO一100組(培養(yǎng)液中DFO終濃度分別為50、100扯mol/L);對照組(培養(yǎng)液中不加入FeCl3和
3、DFO)。細(xì)胞培養(yǎng)后,分別于第12小時、24小時和48小時收集各組培養(yǎng)細(xì)胞,細(xì)胞總RNA的提取參照組織/細(xì)胞總RNA提取試劑盒要求進(jìn)行,提取后液氮凍存。采用RTPCR半定量法測定IRP2mRNA、FnmRNA、TfRmRNA和WTlmRNA等指標(biāo)的相對表達(dá)量結(jié)果1。IRP2mRNA:各實(shí)驗(yàn)組之間IRP2mRNA的表達(dá)量變化不大,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理,組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F前曠1199P005)。細(xì)胞培養(yǎng)時間對IRP2mRNA的表達(dá)有影響,經(jīng)統(tǒng)
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