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文檔簡介
1、目的:血小板在動(dòng)脈血栓形成過程中起重要作用,它通過其表面的膜糖蛋白GPIb-1X-V復(fù)合物的α鏈,與von Willebrand Factor (vWF)結(jié)合,產(chǎn)生有力的信號導(dǎo)致血小板激活和聚集,最終導(dǎo)致血栓形成。血栓還可發(fā)生在因動(dòng)脈粥樣硬化而造成高度狹窄的動(dòng)脈,通過產(chǎn)生高切應(yīng)力造成流動(dòng)的vWF因子與血小板GPIbα再次結(jié)合,從而不通過其它的激動(dòng)劑再次激活血小板,造成血小板聚集,促進(jìn)血栓形成。血小板膜GPIbα有三種基因多態(tài)性:HPA-
2、2基因多態(tài)性能改變其抗原性和結(jié)構(gòu);Kozak基因多態(tài)性調(diào)節(jié)其表達(dá)水平;VNTR基因多態(tài)重復(fù)序列可以使GPIb與vWF結(jié)合位點(diǎn)延伸,影響GPIb與vWF的親和力,從而影響血小板的粘附、聚集和活化反應(yīng),進(jìn)一步調(diào)節(jié)血栓形成。本研究旨在探討GPIb 0VNTR、Kozak、HPA-2基因多態(tài)性的基因型和等位基因在中國濟(jì)南地區(qū)漢族人群中的分布規(guī)律,并深入研究這種多態(tài)性與腦梗死的相關(guān)性,以期為缺血性腦血管病的早期檢測和防治提供分子遺傳學(xué)依據(jù)。
3、 方法:采用病例一對照研究,選擇119例經(jīng)顱腦CT或MRl確診的發(fā)病時(shí)間在72小時(shí)以內(nèi)的急性腦梗死患者作為病例組,166例無神經(jīng)系統(tǒng)疾病的查體者作為對照組。分別采用Qiagen小量血液DNA提取試劑盒方法提取DNA,并應(yīng)用PCR的方法,將DNA進(jìn)行擴(kuò)增,將所得產(chǎn)物進(jìn)行酶切。然后將酶切后的DNA片斷進(jìn)行電泳。對所得結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,采用SPSS 11.0軟件包;計(jì)量資料表示為均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s),組間比較采用單因素方差分析(one-
4、way ANOVA);計(jì)數(shù)資料表示為率,其組間比較采用卡方檢驗(yàn)(x<'2>檢驗(yàn)):將各危險(xiǎn)因素進(jìn)行Logistic多元回歸分析,相對危險(xiǎn)率以比數(shù)比(OR)及雙側(cè)結(jié)果表達(dá)95%的可信區(qū)間(CI)表示;P值小于0.05時(shí)有顯著性差異。 結(jié)果:在本研究人群中,血小板膜GPIbα VNTR DD基因型在腦梗死病例組中的分布頻率顯著高于對照組(P=0.02,OR=2.12,95%CI 1.14-3.92)。血小板膜GPIb a VNTR
5、D等位基因在腦梗死組中的分布頻率也顯著高于對照組(P=0.02,OR=1.49,95%CI=1.06-2.10)。經(jīng)L,ogistic多元回歸分析知,VNTR DD基因型OR值為2.14(95%CI,1.11-4.13),故VNTR DD基因型是腦梗塞的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。與對照組相比,病例組血小板膜GPIbα Kozak以及HPA-2多態(tài)性的基因型分布頻率和等位基因分布頻率,無顯著性差異。血小板膜GPIbα HPA-2和IbaVNTR基因多
6、態(tài)性之間存在連鎖不平衡,HPA-2b等位基因與VNTR的A和B等位基因連鎖不平衡,而HPA-2a等位基因與VNTR的C和D等位基因連鎖不平衡。 結(jié)論:在中國濟(jì)南地區(qū)漢族人群中,血小板膜GPIbα VNTR基因多態(tài)性與腦梗死相關(guān),DD基因型和D等位基因可能是腦梗死的獨(dú)立危險(xiǎn)因素;血小板膜GPIbα HPA-2和VNTR之問存在連鎖不平衡;血小板GPIbα Kozak以及HPA-2基因多態(tài)性與腦梗死無顯著性相關(guān);本研究在進(jìn)一步揭示中
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