杜仲綠原酸的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定及微膠囊化的研究.pdf

1、杜仲是我國(guó)的傳統(tǒng)的經(jīng)濟(jì)作物,其藥用價(jià)值一直備受關(guān)注。作為天然的綠色植物,具有利膽、降壓、抗菌、消炎及升高白細(xì)胞等藥理作用,是一種重要的可再生資源。其中綠原酸(咖啡酸和奎尼酸縮合的縮酚酸)是杜仲中重要的活性成分。本研究課題是對(duì)杜仲葉中的綠原酸進(jìn)行提取、分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定、微膠囊及杜仲茶酸奶功能性酸奶的研究。本文以湖北老龍洞杜仲開(kāi)發(fā)有限公司提供的杜仲葉為主要原料,利用現(xiàn)代化的分離手段和新型的微膠囊化技術(shù)對(duì)杜仲葉中的綠原酸進(jìn)行研究。通過(guò)酵母細(xì)

2、胞壁包埋綠原酸可提高綠原酸的穩(wěn)定性,為綠原酸類(lèi)保健品的貯藏提供有利的方案。同時(shí),對(duì)杜仲茶酸奶的研制工藝進(jìn)行優(yōu)化,研制出新型的保健型杜仲茶酸奶。本實(shí)驗(yàn)所得主要結(jié)果如下:
　　 1、杜仲綠原酸的提取：以湖北襄樊地區(qū)的杜仲葉為原料,采用乙醇超聲提取杜仲葉中的綠原酸。通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn),正交實(shí)驗(yàn)確定最佳提取條件,研究表明,在乙醇濃度為60％、提取溫度60℃、料液比為1:20、提取液的pH值為3的條件下,杜仲葉中綠原酸的提取率達(dá)到最大,為6.

3、1％。
　　 2、杜仲綠原酸的分離純化及結(jié)構(gòu)鑒定：對(duì)NKA-2、NKA-9、AB-8、XD-2、D14、D16、SIPI-DA201七種大孔樹(shù)脂進(jìn)行篩選,NKA-2型大孔樹(shù)脂對(duì)綠原酸有較好的選擇性,其吸附率和解吸率分別為99.67％和62.8％。鹽酸調(diào)整洗脫液的pH為3,洗脫液的濃度為30％時(shí),洗脫效果最好。澄清后的綠原酸粗提液經(jīng)乙酸乙酯萃取除去黃酮,再用NKA-2型樹(shù)脂進(jìn)行梯度洗脫,可得到純度為76.3％的綠原酸。HPLC-M

4、S分析表明,綠原酸是咖啡酸和奎尼酸縮合的縮酚酸。
　　 3、杜仲提取物和綠原酸純品抗氧化活性的對(duì)比：分別采用K3[Fe(CN)6]、Fenton法、鄰苯三酚自氧法測(cè)定杜仲提取物和綠原酸純品的還原力、對(duì)·OH的清除率,對(duì)超氧陰離子的清除率,并以Vc最參照。結(jié)果表明:杜仲提取物的各項(xiàng)抗氧化性能均高于綠原酸純品,而Vc對(duì)超氧陰離子的清除能力最強(qiáng)可達(dá)到100％。
　　 4、綠原酸酵母細(xì)胞微膠囊化的研究：采用釀酒酵母的細(xì)胞壁包埋水

5、溶性的綠原酸,通過(guò)正交試驗(yàn)考察包埋溫度、包埋時(shí)間、芯材比等因素對(duì)綠原酸微膠囊包埋率的影響。結(jié)果表明,在包埋溫度40℃、包埋時(shí)間6h、芯材比為3:1(g/g),以6ml,蒸餾水為包埋介質(zhì)的組合條件下,包埋率最大為18.9％。微膠囊紅外光譜分析發(fā)現(xiàn)綠原酸的特征官能團(tuán)的振動(dòng)消失；熒光顯微鏡觀察顯示微膠囊呈球形,微膠囊內(nèi)的綠原酸自發(fā)明亮的熒光；高效液相色譜定性分析顯示,綠原酸包埋前后保留時(shí)間及紫外掃描圖譜相一致。研究結(jié)果表明綠原酸成功的包埋到酵

6、母細(xì)胞壁內(nèi),且在包埋過(guò)程中沒(méi)有發(fā)生任何化學(xué)變化。
　　 5、杜仲茶酸奶的研制及茶粉對(duì)酸奶品質(zhì)的影響：以牛乳和杜仲茶粉為主要原料,經(jīng)乳酸菌發(fā)酵后,制成茶粉與酸奶結(jié)合的功能性新型酸奶。通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)考察了杜仲茶粉添加量、加糖量、接種量和穩(wěn)定劑的添加量對(duì)酸奶品質(zhì)的影響。結(jié)果表明,當(dāng)杜仲茶粉添加量0.15％、白砂糖添加量6％、發(fā)酵劑接種量8％、穩(wěn)定劑添加量0.1％時(shí),酸奶色澤、香氣、滋味及組織狀態(tài)具佳。杜仲茶粉和杜仲綠原酸純品均能影響酸奶