腫瘤抑制基因PTEN蛋白、C-erbB-2、ER和PR在乳腺癌中的表達及意義.pdf

1、目的：乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一，嚴重地危害女性健康。目前，乳腺癌發(fā)生發(fā)展的分子機制仍不完全清楚。1997年發(fā)現(xiàn)的抑癌基因PTEN(phophatase and tensin homolog deleted on chromosome 10)是繼P53基因之后的與各種腫瘤密切相關的新的抑癌基因，是第一個具有磷酸酯酶活性的抑癌基因。本研究目的在于運用免疫組化方法探討PTEN在乳腺癌中的表達情況，通過比較其在乳腺原位癌、浸潤型乳腺癌和乳

2、腺纖維腺瘤中的表達是否存在差異性，來評價PTEN對乳腺癌惡性程度以及預后情況判斷的價值。同時，將其與已知的其他乳腺癌預后因子ER、PR、C-erbB-2相比較，了解其相關性。從而探討PTEN的不同表達與乳腺癌不同的臨床病理因素、分期、預后的關系和臨床意義。 材料與方法從赤峰學院附屬醫(yī)院1995年1月-2000年6月期間手術切除并術后行病理學證實為浸潤型乳腺癌病436例患者中，隨機抽取30例，年齡從24歲-85歲，平均年齡47.9

3、歲，小于45歲16例，占53.3％，大于45歲14例，占46.6％；絕經(jīng)前24例，絕經(jīng)后6例；國際TNM臨床分期：II a期9例、Ⅱb期8例、Ⅲ a期8例、Ⅲ b期5例、無IV期患者。腋淋巴結轉(zhuǎn)移14例，無腋淋巴結轉(zhuǎn)移16例。全組病例隨訪截止到2005年10月，30例中有14例復發(fā)，復發(fā)部位在引流區(qū)域淋巴結10例，手術局部復發(fā)4例；遠處轉(zhuǎn)移有23例，其中骨轉(zhuǎn)移8例、肺轉(zhuǎn)移5例、肝轉(zhuǎn)移4例、多器官轉(zhuǎn)移6例。到目前為止，術后生存期平均63個

4、月，最長90個月，最短19個月，5年生存率64.28％。腫瘤大小最大為7.00cm，最小1.50cm，平均3.99cm。在同樣時期手術切除并術后行病理學證實為乳腺原位癌的河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院、北京大學第一醫(yī)院、赤峰學院附屬醫(yī)院病例共83例患者中，隨機抽取30例。良性對照組：從門診手術病理證實為乳腺纖維腺瘤患者中隨機選擇30例。所有組織經(jīng)10％福爾馬林固定，經(jīng)病理學復查確診。本實驗組病例手術方式均采用國內(nèi)統(tǒng)一標準的乳腺癌改良根治術，本組病

5、例術前均未行任何抗腫瘤治療，術后均按照乳腺癌術后標準進行放、化療治療。應用免疫組織化學染色SP法檢測PTEN、ER、PR、以及C-erbB-2蛋白在全部標本中的表達。PTEN結果判定(半定量法)：PTEN蛋白的陽性信號主要存在于胞漿中，極少數(shù)存在于細胞核和核膜上，呈棕黃色顆粒，細胞被染成棕色并明顯高于背景染色者為細胞陽性，于高倍視野內(nèi)隨機記數(shù)100個細胞，記錄陽性細胞數(shù)目，陽性計數(shù)在1～24個為PTEN(+)，25～49個為PTEN(+

6、+)，50-74個為PTEN(+++)，大于75個為PTEN(+++)，在分析時將+～++為低表達；+++～++++為高表達。ER、PR結果判定(半定量法)：細胞被染成棕色并明顯高于背景染色者為細胞陽性，于高倍視野內(nèi)隨機記數(shù)100個細胞，陽性細胞數(shù)超過10個為陽性，陽性細胞數(shù)小于10個為陰性C-erbB-2結果判定(半定量法)：細胞被染成棕色并明顯高于背景染色者為細胞陽性，于高倍視野內(nèi)隨機記數(shù)100個細胞，記錄陽性細胞數(shù)，陽性細胞數(shù)小于

7、10個為C-erbB-2陰性：記錄陽性細胞數(shù)超過10個為C-erbB-2陽性。其他病理學指標：病理組織學分化程度根據(jù)Bloom和Richardson(1957)乳腺癌組織學分級標準而定，分為Ⅰ級，Ⅱ級，Ⅲ級。臨床分期根據(jù)國際TNM分期標準分為Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期；其中T為病理學腫瘤的大小，N為腋窩淋巴結狀況，M為遠處轉(zhuǎn)移情況；Ⅰ期～Ⅱ期為早期，Ⅲ期～Ⅳ期為晚期?；颊吲R床病理資料均來源于存檔病案。乳腺癌的PTEN、C-erbB-2、ER

8、、PR表達的數(shù)據(jù)處理采用SPSS 10.0統(tǒng)計學軟件包，采用x2檢驗各表達與臨床病理資料相關性分析，實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(x±S)表示。P＜0.05為有統(tǒng)計學意義，P＜0.01為有統(tǒng)計學顯著意義。 結果：PTEN的表達情況：30例浸潤型乳腺癌中高表達有13例，高表達率43.33％；30例原位癌高表達23例，高表達率76.67％；30例乳腺纖維腺瘤中PTEN高表達25例，高表達率83.33％。浸潤型乳腺癌的PTEN高表達率與原位

9、癌和乳腺纖維腺瘤有統(tǒng)計學差異(p＜0.01)。在浸潤型乳腺癌中：PTEN的表達與腫塊大小、病理分期、復發(fā)與否無相關性；而與是否有淋巴結轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、發(fā)病年齡、絕經(jīng)與否、術后5年生存期等指標相關。 ER、PR的表達情況：本組30例浸潤型乳腺癌中ERI(+)/PR(+)表達有16例，陽性率53.33％，ER(一)/PR(一)表達有11例，陰性表達率36.67％；在30例原位癌組中ER(+)/PR(+)表達有15例，陽性率50.00

10、％，ER(一)/PR(一)表達有9例，陰性表達率30.00％。；在30例乳腺纖維腺瘤組中ER(+)/PR(+)表達有15例，陽性率50.00％ER(一)/PR(一)表達有10例，陰性表達率33.33％。在浸潤型乳腺癌中：ER、PR的陽性表達與腫瘤的大小、分期、腋淋巴結轉(zhuǎn)移情況、年齡、絕經(jīng)情況、術后復發(fā)、有無遠端轉(zhuǎn)移等情況均無相關性；僅與術后生存期正相關。 C-erbB-2的表達情況：在浸潤型乳腺癌、原位癌和乳腺纖維腺瘤中C-erbB-2

11、的陽性率分別為80.00％，53.33％，0。C-erbB-2在浸潤型乳腺癌與乳腺纖維腺瘤兩組中的表達進行比較有顯著性差異(P＜0.01)，在浸潤型乳腺癌與原位癌兩組比較亦有顯著性差異(P＜0.01)，而原位癌與乳腺纖維腺瘤仍有顯著性差異。在浸潤型乳腺癌中：C-erbB-2陽性表達率隨組織學分級的增高而增加℃-erbB-2陽性表達率與分期呈正相關。但與年齡、淋巴結轉(zhuǎn)移情況等無明顯相關性。 PTEN與ER、PR、C-erbB-2的

12、關系：實驗表明，PTEN的高表達在浸潤型乳腺癌中與ER正相關，而與PR無相關性。在乳腺原位癌組正相關。PTEN與C-erbB-2在乳腺癌中的表達無相關性，同時存在PTEN失表達和C-erbB-2過表達的乳腺癌患者腫瘤具有更強的侵襲性，預后更差。 結論：腫瘤抑制基因PTEN蛋白在乳腺癌組織中存在表達的缺失和減弱，并與是否有淋巴結轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、發(fā)病年齡、絕經(jīng)與否、術后5年生存期等指標相關。提示其表達異常與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展及預后有

13、關。在乳腺原位癌和浸潤型乳腺癌PTEN的表達有差異，而原位癌和乳腺纖維腺瘤的PTEN表達無明確統(tǒng)計學差異。說明PTEN與乳腺癌的預后有一定的相關性。并與腫瘤的進展相關，而與腫瘤的啟動關系并不十分密切，與乳腺癌的侵襲性反相關。結合文獻我們認為PTEN的檢測對評價乳腺癌的侵襲性，判斷預后有意義。 ER、PR、C-erbB-2是目前比較公認乳腺癌預后因子，其測定有助于了解乳腺癌的惡性程度，評價乳腺癌的預后。同時ER、PR的檢測還可以指