胰腺腫瘤β—連環(huán)蛋白基因變異及其產(chǎn)物表達(dá)狀況的研究.pdf

1、[目的]：Wnt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑是調(diào)控細(xì)胞生長增殖的關(guān)鍵途徑，在胚胎發(fā)育 和腫瘤發(fā)生中起著重要作用。近年來的研究表明，Wnt信號通路的紊亂與多種人 類腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。由于原癌基因β-連環(huán)蛋白(β-catenin)激活突變或 腫瘤抑制基因結(jié)腸腺瘤樣息肉病蛋白(adenomatous polyposis coli,APC)失活突變 等因素引起的該途徑的異常激活可以啟動下游靶基因細(xì)胞周期蛋白DI (cyclinDl)及c-myc等，

2、致使細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化，發(fā)生腫瘤。Wnt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑異 常的核心機(jī)制是游離的β-catenin蛋白在細(xì)胞質(zhì)和胞核中積累，并通過其下游途 徑引發(fā)特異靶基因cyclinDl等的表達(dá)。本實驗通過檢測β-catenin和cyclinDl 蛋白的表達(dá)及β-catenin基因第3外顯子變異的情況，探討β-catenin的異常表 達(dá)、cyclinDl的高表達(dá)及β-catenin基因變異與胰腺實性一假乳頭狀瘤 (solid-pseudopapill

3、ary rumor fpancreas，sPT)發(fā)生、發(fā)展及浸潤的關(guān)系。并以期 尋找鑒別胰腺實性-假乳頭狀瘤和胰島細(xì)胞瘤的輔助指標(biāo)，為臨床病理診斷提供 頭驗依據(jù)。 [方法]：應(yīng)用免疫組織化學(xué)鏈霉素抗生物素蛋白一過氧化物酶(streptaVidin．peroxidase,SP)法及聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction，PCR)法和DNA直接測序法檢測20例胰腺實性一假乳頭狀瘤、10例胰島細(xì)胞

4、瘤、10例正常胰腺組織中β-catenin、cyclinDl的表達(dá)情況及20例胰腺實性一假乳頭狀瘤、10例胰島細(xì)胞瘤標(biāo)本中β-catenin基因第3外顯子變異的情況。 [結(jié)果]：在正常胰腺組織中β-catenin均正常表達(dá)，而cycJinDl均呈陰性。β-catenin在實性一假乳頭狀瘤和胰島細(xì)胞瘤中的異常表達(dá)率分別為90％(18/20)和30％(3/10)；cyclinDl在實性一假乳頭狀瘤和胰島細(xì)胞瘤中的表達(dá)率分別為75

5、％(15/20)和10％(1/10)。這兩種蛋白在實性-假乳頭狀瘤和胰島細(xì)胞瘤中的表達(dá)率均存在顯著性差異(P<0.01)。Β-catenin異常表達(dá)及cyclinDl的表達(dá)均與實性—假乳頭狀瘤浸潤情況無關(guān)(P>0.05)。實性—假乳頭狀瘤中β—catenin異常表達(dá)與cyclinDl的高表達(dá)正相關(guān)(r=0.5774,P<0.05)。10例胰島細(xì)胞瘤標(biāo)本中均未發(fā)現(xiàn)有β—catenin基因第3外顯子的變異。在20例實性一假乳頭狀瘤標(biāo)本中，有

6、2例檢測到β—catenin基因外顯子3的錯義突變，其變異率與胰島細(xì)胞瘤無顯著性差異(P>0.05)。胰腺實性-假乳頭狀瘤中β—catenin基因變異與其產(chǎn)物的表達(dá)無相關(guān)性(r=0.1111，P>0.05)。 [結(jié)論]：β—catenin的異常表達(dá)激活cyclinDl引起細(xì)胞增殖和分化失控，在胰腺實性—假乳頭狀瘤的發(fā)生機(jī)制中可能起重要作用；聯(lián)合檢測β—catenin和cyclinDl的蛋白表達(dá)可能有助于區(qū)分胰腺實性一假乳頭