苜蓿-根瘤菌高效共生體系篩選及分子標記研究.pdf

1、在溫室條件下，采用水培和蛭石栽培方式，對4個紫花苜蓿(MedicagaSativa)品種分別接種10株苜蓿根瘤菌的共生效應進行研究。以地上部分干重、總根瘤數(shù)和地上部分高度三個指標，擬篩選出對苜蓿品種具有最佳共生效應的根瘤菌菌株。在此基礎(chǔ)上，實驗還探索了BOX-PCR、16SrDNAPCR-RFLP、nodAPCR-RFLP、nifHPCR-RFLP以及nodA序列分析等分子生物學技術(shù)用于揭示苜蓿根瘤菌與苜蓿品種相互作用，結(jié)果如下。

2、 蛭石栽培的生長效應優(yōu)于水培，本研究中主要以蛭石栽培結(jié)果進行高效共生根瘤菌篩選。蛭石共生實驗結(jié)果表明，接種根瘤菌后，植株地上部分干重、株高和總根瘤數(shù)均比對照增加，但不同苜蓿根瘤菌與苜蓿品種間的共生效應存在差異。水培結(jié)果蛭石栽培與WL323最佳匹配的根瘤菌為NMG024-1，XJ96375和XJ96411，干重分別比對照增加775.0％、443.8％、350.0％，總根瘤數(shù)與株高比對照有顯著性增長；Vector共生匹配較好的根瘤菌為NM

3、G052-1，XJ96411和NMG024-1，其中，NMG052-1的接種效果最好，其干重比對照增長了633.3％；而與中苜1號共生匹配較好的根瘤菌包括NMG024-1、NMG024-2和NMG002-2，其中，接種NMG024-1后，其干重比對照增加了618.2％；RS最佳共生匹配的根瘤菌NMG024-2，XJ96379，NMG001-3和NMG024-1，干重、總根瘤數(shù)與株高均比接種其它菌株均有顯著增長。 BOX-PCR指

4、紋分析結(jié)果表明，供試苜蓿根瘤菌的遺傳多樣性明顯，在70％相似水平處，供試菌株被劃分為4個BOX遺傳群。而16SrDNA、nodA、nifHPCR-RFLP及nodA全序列分析結(jié)果表明，這些菌株在系統(tǒng)發(fā)育、共生基因和結(jié)瘤基因方面的差異不明顯。 綜合BOX-PCR結(jié)果和共生效應結(jié)果，BOX-PCR結(jié)果一定程度上較好地反映根瘤菌-豆科植物之間的相互共生關(guān)系。與RS最佳共生匹配的根瘤菌XJ96379，NMG001-3聚在第Ⅰ群中；XJ9