人CYP1A2及CYP3A4重組酶的表達(dá)及其代謝活性研究.pdf

1、藥物大多是外來(lái)分子,進(jìn)入人體后,一些藥物可以以原形從人體排泄出去,然而大多數(shù)藥物需要進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾才易于被排泄。這一結(jié)構(gòu)修飾過(guò)程就被稱為“藥物代謝”。細(xì)胞色素P450(CYP)是最大的藥物代謝酶蛋白超家族之一,主要分布于肝臟中,催化藥物的氧化反應(yīng),90％以上的藥物代謝都要通過(guò)肝微粒體酶的細(xì)胞色素P450進(jìn)行。CYP催化藥物的代謝具有范圍廣、專一性差、結(jié)構(gòu)差別大、個(gè)體差異大、催化底物有交叉重疊性以及易受誘導(dǎo)和抑制等特點(diǎn)。在臨床聯(lián)合用藥時(shí),藥

2、物易在代謝環(huán)節(jié)產(chǎn)生相互干擾,結(jié)果使療效增強(qiáng)甚至產(chǎn)生毒副作用,或療效減弱甚至治療失敗,形成代謝性藥物相互作用。FDA己就藥物代謝及其相互作用的研究公布了相應(yīng)的指導(dǎo)文件,以求在創(chuàng)新藥物的早期研究階段進(jìn)行安全性評(píng)價(jià),減少新藥開(kāi)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn),提高研發(fā)成功率。多年來(lái),由于倫理道德方面的原因,使得對(duì)人P450酶的研究受到限制,而主要采用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物如小鼠、大鼠、兔等作為研究對(duì)象,但因P450酶存在較大的種屬差異,故從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型中所獲數(shù)據(jù)并不能直接反映人P

3、450酶的特征。并且,由于P450類型較多而相對(duì)含量較少,其分離純化十分困難,很難獲得P450單一酶用于藥物代謝研究。隨著生物化學(xué)和分子生物學(xué),如分子克隆、蛋白質(zhì)純化等技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用,使我們有可能對(duì)人P450酶進(jìn)行廣泛而深入的研究,探討其在內(nèi)源性及外源性物質(zhì)代謝中的作用。目前,人們已開(kāi)始廣泛采用體外克隆并表達(dá)人體藥物代謝酶來(lái)進(jìn)行藥物代謝研究,且大多數(shù)CYP同工酶已通過(guò)不同表達(dá)系統(tǒng)在體外獲得表達(dá)。例如在大腸桿菌(E.coli)、酵母、桿