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文檔簡介
1、西北農林科技大學碩士學位論文蘋果黑星病菌遺傳多樣性的SSR分析姓名:董艷玲申請學位級別:碩士專業(yè):植物病理學指導教師:楊家榮20050601GENETICDIVERSITYOFVenturiainaequalisOFAPPLEWITHSSRANALYSISABSTRACTApplescab,causedbyVenturiainaequalis(Cooke)Wint,isoneofthemostseriousdiseasesofapple
2、andornamentalcrabappleBothleavesandfruitsCallbeinfectedInfectedleavesmaydropearlyresultinginweakeningtrees,withpoorfruitproductionInfectedfruitsareblemishedandoftenseverelydeformedInChinaapplescab,whichlimitistoonlyOccur
3、inafewlocalsites,ispointedasquarantineobjective,butinrecentyears,thisdiseaseisexpandingtOlargerareasandseverelythreateningtoappleindustryinChinaItwasanewdiseasefoundedfirstlyin1997inXinping,Liquan,Yangling,andXunyiinShaa
4、nxiprovinceThemainresultsobtainedbymolecularanalysiswithSSRthchniqueareasfollows:1ThegenomicDNAofVenturiainaequalisofapplewasextractedbyuseingSquashBlotmethod,whichcarlreducetheharmoftoxicitytoexperimenters,chemicalreage
5、ntsandneedinexpensiveapparatus,ThemainadvantageofthistechniquecangreatlyspeedupexperimentandissimpleandeasytooperationManysamplescanbecrushedontoasinglemembranepiece,andasingleoperatorCananalysehundredsofsamplesinonedayI
6、tcangreatlycutshortofthetimeofextractinggenomicDNAfromVenturiainaequalisofappleUsuallytheconventionalmethodtookmorethanonemonthtoextractgenomicDNAfrommyceliumgrowninculturemedium,butbyusingthismethodonlytookseveraldays2W
7、ehavesetuptheoptimizingSSRreactionsystemofVenturiainaequalis:each25ItLamplificationreactionsolutionWascomprised10xBuffer(MgCl220mmol/L)25ItL,dNTPl00gmoL/L,primers05lamol/L,TaqDNApolymerase15U,templateDNA2mg/L,ddH20195雎L。
8、Amplicationprogramis:2minat93(2,30Sat57“(2:then40cyclesthatconsistedof1minat72℃。30Sat93℃,30Sat57℃;followedby10minextensionat72℃TheresultofPCRamplificationshowedthatthePCRsystemhadgoodrepeatandstability3Wehaveanalyzedtheg
9、eneticdiversityof160isolatesoriginedfromUK,IndiaandSharmxiprovinceofChinaResultsshowedthatisolatesodginedfromChinaUKandmostofisolatesoriginedfromIndiahadcloserelationship,butsomeIndia’SisolatesRDl,G1—10,RI1,G28,G12andRI1
10、2variedinsomedgree,andtherewerenorelationship、vi也thosefromShannxiprovinceofChinaandUKResultsalsoindicaredthatthereWasnelatetionshipbetweenthegeographicdistanceanddiffemetapplecultivarsThisstudyearlhelpUStohavebeRerunders
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