水稻內(nèi)生放線菌OsiRt-1對稻瘟病防治作用研究.pdf

1、稻瘟病是水稻生產(chǎn)上威脅最大的病害之一，主要由真菌梨孢霉菌（Magnaporthe oryzae）感染引起。傳統(tǒng)的化學(xué)防治稻瘟病具有破壞環(huán)境，危害人類健康等缺點，而培育水稻抗病品種難以跟上致病菌生理小種的變異速度而逐漸喪失抗性，因此，微生物農(nóng)藥以其低毒性和不受病原菌抗性影響的特點，越來越受關(guān)注。內(nèi)生菌是可以在植物的整個或部分生長周期中穩(wěn)定定殖的微生物菌群，與植物具有互利互惠的關(guān)系，近年來逐漸成為重要的生防制劑。本實驗室在從生長11周的谷梅

2、4號水稻根部分離并篩選到一株對稻瘟病有較強拮抗作用的內(nèi)生放線菌OsiRt-1。為了進(jìn)一步評定該菌的稻瘟病生防效果，初步探討其作用機制，本論文主要開展了以下四個部分研究:
　　1.采用傳統(tǒng)的形態(tài)培養(yǎng)特征觀察、生理生化測定以及16S rRNA序列分析，將菌株OsiRt-1鑒定為米修鏈霉菌（Streptomyces misionensis）。
　　2.研究菌株OsiRt-1對稻瘟病菌的體外抗病作用。通過平板對峙實驗，檢測到OsiR

3、t-1對供試稻瘟病菌生理小種RB3、Guy11、62、61、SO7均具有抗性，且對RB3，Guy11具有較強拮抗作用，拮抗距離均大于20mm;環(huán)境掃描電鏡(SEM)對稻瘟病菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察發(fā)現(xiàn)，OsiRt-1處理過的稻瘟病菌RB3菌絲出現(xiàn)了如細(xì)胞壁皺縮、細(xì)胞膨脹等一系列畸形變化，表明OsiRt-1可以抑制稻瘟病菌RB3菌絲生長;通過研究不同天數(shù)的OsiRt-1發(fā)酵濾液對抑菌活性影響，發(fā)現(xiàn)其抑菌效果隨著培養(yǎng)時間的增加而增強，當(dāng)菌株在第六天

4、生長量達(dá)最大時，其發(fā)酵濾液的抑菌率可達(dá)到28.06％。
　　3.通過定性檢測實驗發(fā)現(xiàn)OsiRt-1具有可能降解真菌細(xì)胞壁的纖維素酶、蛋白酶活性，同時可產(chǎn)生植物生長促進(jìn)劑鐵載體、IAA、ACC脫氨酶。通過PCR檢測，發(fā)現(xiàn)菌株OsiRt-1呈現(xiàn)聚酮合酶基因(PKSⅡ型)和非核糖體多肽合成酶基因(NRPS)陽性。
　　4.研究OsiRt-1在大田條件下對稻瘟病抗病作用。在水稻生長至第10、20天噴灑OsiRt-1孢子液，與空白組苗

5、瘟病情指數(shù)(46.75％)相比，處理組苗瘟病情指數(shù)降低了7.76％。在水稻生長至第50、80天噴灑OsiRt-1孢子液，處理組的病情指數(shù)56.67％明顯低于空白組76.22％，同時，與空白組種子損失率(44.61％)相比，處理組的種子損失率降低了17.46％?？共〗Y(jié)果顯示，OsiRt-1對穗瘟的防治效果明顯優(yōu)于苗瘟。苗期和抽穗期重分離結(jié)果顯示，OsiRt-1處理過的水稻地上部分，其分離的OsiRt-1占內(nèi)生放線菌的比例(81.08％，3

6、3.33％)，明顯高于未處理水稻(33.33％，0.00％)。
　　本論文初步探討了OsiRt-1對稻瘟病菌的抑制作用，為放線菌的生物防治提供了基礎(chǔ);通過分析其與生防相關(guān)的次級代謝產(chǎn)物，為進(jìn)一步深入了解該放線菌抗病機制奠定了理論基礎(chǔ);通過針對OsiRt-1在大田復(fù)雜條件下的控病效果研究，為微生物新農(nóng)藥的開發(fā)利用提供依據(jù);本論文的重點是從一種新的資源內(nèi)生菌中挖掘了一株生防菌株OsiRt-1，在水稻稻瘟病防治的農(nóng)業(yè)應(yīng)用上，具有較好的開