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文檔簡介
1、真菌毒素種類和數(shù)量直接影響到糧食儲藏加工的質(zhì)量和安全,研究產(chǎn)毒真菌多樣性及真菌毒素積累規(guī)律,具有重要意義。本文以小麥和玉米為研究原料,通過模擬儲藏環(huán)境,采用真菌菌相培養(yǎng)分析、PCR-DGGE等技術(shù),分析測定不同儲藏環(huán)境下的真菌多樣性,高效液相色譜技術(shù)(HPLC)測定真菌毒素,對主要產(chǎn)毒真菌數(shù)量與主要真菌毒素積累量間的變化規(guī)律規(guī)律進行研究,利用復(fù)配防霉劑及復(fù)配抑菌劑對樣品處理后,研究在儲藏過程中微生物菌落總數(shù)及品質(zhì)的變化規(guī)律及建立產(chǎn)毒真菌
2、的多重PCR檢測體系。
主要研究結(jié)果如下:
1.將初始水分含量12.42%、14.30%、15.89%、17.62%、19.88%的玉米在溫度30℃,相對濕度(RH)為75%、84%和92%的模擬環(huán)境中貯藏35 d后:在中、高濕環(huán)境中黃曲霉生長及產(chǎn)毒受其他微生物抑制較大。經(jīng)相關(guān)性分析,在溫度30℃RH75%儲藏環(huán)境中,玉米上黃曲霉和黑曲霉總數(shù)均與黃曲霉毒素B1呈極顯著正相關(guān)性(P<0.001,κ≥0.997);在溫度
3、30℃RH84%環(huán)境中,玉米上黑曲霉總數(shù)與黃曲霉毒素B1呈顯著正相關(guān)性(P<0.05,κ=0.921)。
2.將初始水分含量12.41%、14.30%、15.89%、17.62%、19.88%的玉米在30℃,相對濕度(RH)為75%、84%和92%的模擬環(huán)境中儲藏28 d。結(jié)果表明:在低濕度環(huán)境下,初始水分對木霉抑制ZEA隨初始水分升高而迅速增強;在中高濕度環(huán)境下,木霉對ZEA的抑制效果增強,受初始水分影響較小。經(jīng)相關(guān)性分析,
4、不同含水量的玉米在30℃儲藏28天后,在RH75%的環(huán)境下,玉米中的霉菌、木霉、串珠鐮刀菌數(shù)量和水分含量均與ZEA的積累量呈負相關(guān);在RH92%的環(huán)境下,均呈正相關(guān);在RH84%的環(huán)境下,木霉量和水分含量與ZEA積累量呈顯著正相關(guān)(P<0.05),鐮刀菌和霉菌總量與ZEA積累量呈負相關(guān)。結(jié)果表明,在中低濕度環(huán)境下,ZEA的含量受生物因素和環(huán)境因素的影響較大;在高濕度環(huán)境下,ZEA含量主要由鐮刀菌控制。
3.用山梨酸鉀、仲丁胺與
5、那他霉素組成不同比例的復(fù)配防霉劑處理小麥,經(jīng)30℃、相對濕度75%條件下貯藏35 d后:那他霉素和山梨酸鉀復(fù)配物對小麥中的曲霉、青霉的抑制率分別為9423和7倍,確定了真菌復(fù)配防霉劑的最佳組合為每千克小麥0.015 g那他霉素和1 g山梨酸鉀。相關(guān)性分析表明:黏度指標中的峰值黏度、最低黏度、最終黏度和回生值均與小麥真菌總數(shù)、曲霉總數(shù)、青霉總數(shù)呈現(xiàn)明顯正相關(guān)性,各個復(fù)配處理的脂肪酸值與真菌各菌落數(shù)呈顯著正相關(guān)性(P<0.05)。
6、 4.用山梨酸鉀、仲丁胺與乳酸鏈球菌素(Nisin)組成復(fù)配抑菌劑處理小麥,經(jīng)30℃、相對濕度75%條件下儲藏35 d。結(jié)果表明:微生物復(fù)配抑菌劑的最佳組合為每千克小麥0.20 g Nisin、1.00 g山梨酸鉀和2.00 g仲丁胺。相關(guān)性分析表明:小麥的真菌總數(shù)、曲霉數(shù)、青霉數(shù)、芽孢桿菌數(shù)、細菌數(shù)均與脂肪酸值和總酸值呈明顯正相關(guān),與小麥沉淀值呈明顯負相關(guān)。
5.通過設(shè)計黃曲霉、煙曲霉、鐮刀菌的特異性引物,建立三種菌的三重P
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