薏苡仁中常見真菌毒素的檢測(cè)方法及不同儲(chǔ)藏條件下真菌毒素含量變化的研究.pdf

1、真菌毒素是一類由真菌產(chǎn)生的二次有毒代謝物。糧食、飼料或基于植物源性的中藥材在生長(zhǎng)、采集、儲(chǔ)藏以及加工過程中均可能污染各種真菌，進(jìn)而產(chǎn)生多種真菌毒素殘留。在目前發(fā)現(xiàn)的真菌毒素中，與人們健康相關(guān)的真菌毒素主要包括黃曲霉毒素(aflatoxin，AF)、玉米赤霉烯酮(zearalenone，ZON)、赭曲霉毒素(OTA)等。易通過污染玉米、小麥等糧食作物進(jìn)入人和動(dòng)物體內(nèi)引起中毒。總結(jié)現(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)，藥食兩用中藥薏苡仁被AF或ZON污染的頻率較高

2、，故針對(duì)《中國(guó)藥典》對(duì)ZON毒素的檢測(cè)方法和限量標(biāo)準(zhǔn)缺乏，和真菌毒素多殘留分析方法的缺乏現(xiàn)狀，選擇薏苡仁為重點(diǎn)監(jiān)控中藥品種，通過篩選不同凈化方法，開展了ZON、α-ZOL兩種真菌毒素同時(shí)檢測(cè)方法和AF、ZON及其衍生物共七種真菌毒素多殘留同時(shí)檢測(cè)方法的研究，為藥材中多種真菌毒素的同時(shí)檢測(cè)方法提供參考。同時(shí)，為降低、控制真菌毒素污染，初步探尋了不同儲(chǔ)藏條件下薏苡仁中真菌毒素含量變化的規(guī)律。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)論如下:
　　(1)通過比較

3、多種固相萃取小柱的凈化效果，建立了薏苡仁中ZON和α-ZOL石墨化炭黑柱凈化-高效液相色譜-熒光檢測(cè)法(HPLC-FLD)，α-ZOL與ZON的平均回收率分別為83.2％和86.1％，RSD均低于6.68％，方法檢測(cè)限分別為15μg/kg和13μg/kg。本方法將石墨化炭黑運(yùn)用于薏苡仁ZON和α-ZOL的凈化富集中，并結(jié)合高效液相色譜進(jìn)行檢測(cè)，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，與免疫親和柱、質(zhì)譜等材料或設(shè)備相比，經(jīng)濟(jì)實(shí)用，易于推廣，為ZON及其衍生物

4、的分析方法提供參考和新思路。
　　(2)本文通過比較多種前處理小柱的凈化效果，采用免疫親和柱凈化，在線柱后光化學(xué)衍生和HPLC-FLD建立了薏苡仁中AFG2、AFG1、AFB2、AFB1、ZON、α-ZOL和β-ZOL共7種真菌毒素的同時(shí)檢測(cè)方法。7種真菌毒素的平均回收率為85.8％～97.0％，RSD均低于11.93％。該方法采用AF和ZON二合一免疫親和柱凈化，在線光化學(xué)衍生，與中國(guó)藥典方法相比，操作簡(jiǎn)便且靈敏度高，并可同時(shí)檢

5、測(cè)AF和ZON等7種真菌毒素。進(jìn)一步對(duì)不同產(chǎn)地的多批次薏苡仁進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果表明薏苡仁易同時(shí)污染AFB1與ZON，檢測(cè)的樣品中ZON的污染范圍在44.71～931.07μg/kg，處于較高水平。此污染現(xiàn)象應(yīng)予以重視。
　　(3)通過模擬高溫高濕、低溫密封和藥材常規(guī)保存的通風(fēng)干燥3種條件，分析薏苡仁在90天內(nèi)不同儲(chǔ)藏條件下常見真菌毒素的產(chǎn)生情況。檢出結(jié)果表明儲(chǔ)藏條件對(duì)真菌毒素的含量變化有重要影響。外觀未發(fā)霉的薏苡仁也有可能含有大量真