棗果實(shí)病原真菌的鑒定及鏈格孢屬病原真菌多樣性研究.pdf

1、近年來?xiàng)椆麑?shí)病害種類和危害程度不斷增加，嚴(yán)重時(shí)可造成絕產(chǎn)絕收。已報(bào)道的果實(shí)病害中同病異名和同菌異名現(xiàn)象普遍。棗果實(shí)病害病名和病原種類的混亂和不確定性，給該類病害的預(yù)測、防治及學(xué)術(shù)交流帶來了障礙。本文對中國幾個(gè)主要棗產(chǎn)區(qū)（河南省新鄭、濮陽、登封，新疆阿拉爾，河北石家莊，山東省沾化等地）棗果實(shí)病害進(jìn)行了較為系統(tǒng)的調(diào)查研究，詳細(xì)觀察了各棗產(chǎn)區(qū)主要棗果病害的癥狀特點(diǎn)及發(fā)病情況，對不同類型病果病原菌進(jìn)行了分離純化和保存、致病性測定以及形態(tài)鑒定和分

2、子鑒定。從六種不同癥狀病果上共分離鑒定出8種病原真菌及部分未定名真菌。首次發(fā)現(xiàn)并證明層出鐮刀菌Fusarium proliferatum和尖孢鐮刀菌Fusarium oxysporum可引起棗田間軟腐病。首次從新鄭棗縮果病果實(shí)中分離出能夠引起棗果發(fā)病的鴨梨鏈格孢Alternariayaliinficiens R.G.Roberts。對于能夠引起多種棗果實(shí)病害癥狀的鏈格孢屬病原真菌，選取了56株具有代表性種的菌株進(jìn)行ISSR遺傳多樣性分析

3、。本研究為棗果實(shí)病害的準(zhǔn)確鑒定、致病規(guī)律和科學(xué)防治研究奠定基礎(chǔ)。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下。
　　1.對我國主要棗主產(chǎn)區(qū)的棗果病害樣本進(jìn)行收集并對分離菌株進(jìn)行整理和鑒定
　　2011-2012年分別于河南省新鄭市灰棗、濮陽市扁核酸、登封市冬棗、梨棗，河北石家莊扁核酸、滄州金絲小棗，新疆阿拉爾灰棗、阿克蘇駿棗，山東沾化冬棗、泰安冬棗等，共收集病果標(biāo)本十六批二百多個(gè)。對發(fā)病果實(shí)發(fā)病部位進(jìn)行組織分離、純化、保存病原菌，并用分離物進(jìn)行室內(nèi)回接

4、和田間回接，致病性測定和病原種鑒定。對以上病果進(jìn)行分離，共分離到菌株483株，經(jīng)過科赫氏法則驗(yàn)證確定為能夠致病的菌株有256株，依據(jù)真菌的傳統(tǒng)形態(tài)特征鑒定方法結(jié)合現(xiàn)代分子鑒定方法對病原菌進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定。
　　2.采集6種棗果病害類型樣本
　　收集到的田間病果主要有以下類型:河南省濮陽地區(qū)的棗縮果病、軟腐病、黑斑病，新鄭棗地區(qū)炭疽病、棗軟腐病，登封地區(qū)黑斑病和一種輪紋斑病，新疆阿拉爾地區(qū)的一種小病斑型病害六種棗果病害類型。

5、>　　3.對棗果病害病原菌的鑒定
　　棗縮果病病原菌種類較為復(fù)雜，除了已報(bào)道的七葉樹殼梭孢Fusicoccum aesculi Corda、頭狀莖點(diǎn)霉Phoma glomerata、鏈格孢Alternaria alternate(Fr.) Keissler和細(xì)極鏈格孢Alternaria tenuissima(Fr.) Wiltshire之外，本研究還分離到了棗縮果病樣本中的鴨梨鏈格孢Alternariayaliinficiens

6、 R.G.Roberts，這種新的病原菌單獨(dú)接種時(shí)未產(chǎn)生典型的棗縮果病癥狀，但是其回接發(fā)病率也是較為顯著的。棗炭疽病除了分離到已報(bào)道的膠孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides之外，還分離到了一種鏈格孢屬病原真菌，其接種時(shí)田間癥狀為黑色凹陷病斑。引起棗軟腐病的病原菌第一次分離到了層出鐮刀菌Fusarium proliferatum和尖孢鐮刀菌Fusarium oxysporum，這兩種病原均能引起棗果軟腐。除

7、此之外七葉樹殼梭孢Fusicoecum aeseuli Corda也是能引起棗果軟腐病害的病原之一。從棗黑斑病中主要分離到了鴨梨鏈格孢Alternariayaliinficiens R.G.Roberts和七葉樹殼梭孢Fusicoccum aesculi Corda，這與之前的報(bào)道不盡相似。新疆的小型病斑樣本中主要分離到了鏈格孢Alternaria alternate(Ft.)Keissler和細(xì)極鏈格孢Alternaria tenui

8、ssima(Fr.)Wiltshire。棗輪紋斑病樣本中分離到的病原菌除了細(xì)極鏈格孢Alternaria tenuissima(Fr.)Wiltshire之外，還有鴨梨鏈格孢Alternariayaliinficiens R.G Roberts。
　　4.采用ISSR技術(shù)和分子鑒定對引起棗果病害的鏈格孢屬病原真菌進(jìn)行研究
　　對于能夠引起棗果病害的鏈格孢屬病原真菌，選取其中有代表性的菌株56株，對其進(jìn)行ISSR遺傳多樣性分析