常見病原性真菌鑒定

1、第十五章 常見病原性真菌鑒定,本 章 內(nèi) 容,,學(xué)習(xí)目標(biāo)：掌握 毛癬菌屬、表皮癬菌屬、小孢子癬菌屬生物學(xué)特性和微生物學(xué)檢驗；白假絲酵母菌、隱球菌生物學(xué)特性和微生物學(xué)檢驗熟悉熟悉深部感染真菌的臨床意義了解其他真菌的生物學(xué)特性和微生物學(xué)檢驗,本章重點： ★毛癬菌屬、表皮癬菌屬、小孢子癬菌屬學(xué)特性和微生物學(xué)檢驗★白假絲酵母菌、隱球菌生物學(xué)特性和微生物學(xué)檢驗,學(xué)習(xí)目標(biāo)及重點,常見病原性真菌鑒定,淺部感染真菌是指主要侵犯人和動物皮膚、

2、毛發(fā)及指（趾）甲，寄生或腐生于表皮、毛發(fā)和甲板的角質(zhì)組織中的真菌。深部感染真菌是能侵害人體深部組織和內(nèi)臟以及引起全身感染的真菌。淺部感染真菌包括皮膚癬真菌、表皮感染真菌和皮下組織感染真菌3類。,第一節(jié) 淺部感染真菌,一、皮膚癬真菌 皮膚真菌是寄生于皮膚角蛋白組織的真菌，又稱皮膚絲狀菌，分表皮癬菌屬、毛癬菌屬和小孢子癬菌屬3個屬，可侵犯皮膚、指（趾）甲和毛發(fā)，引起人類的體癬、股癬、手癬、足癬、甲癬、頭癬等。,一、皮膚癬真菌,第一

3、節(jié) 淺部感染真菌,（一）生物學(xué)特性1.表皮癬菌屬：有2種，對人致病的是絮狀表皮癬菌。鏡檢可見大分生孢子、菌絲較細有分隔、厚膜孢子。,第一節(jié) 淺部感染真菌,表皮癬菌屬,致病菌種：絮狀表皮癬菌侵犯部位：皮膚、指（趾）甲，不侵犯毛發(fā)疾 ?。后w癬、足癬、手癬、股癬和甲癬形態(tài)學(xué)特征： 大分生孢子：側(cè)生或頂生， 棍棒狀，壁薄 小分生孢子：無

4、 單純細菌絲、有隔,腳癬,灰指甲,2.毛癬菌屬：有20余種，對人致病的有13種，常見的致病菌有紅色毛癬菌、紫色毛癬菌、須（石膏樣）毛癬菌、斷發(fā)毛癬菌和許蘭毛（黃）癬菌,第一節(jié) 淺部感染真菌,2.毛癬菌屬：,第一節(jié) 淺部感染真菌,2.毛癬菌屬：顯微鏡下可見大分生孢子、小分生孢子；菌絲形態(tài)多樣,第一節(jié) 淺部感染真菌,2.毛癬菌屬：,第一節(jié) 淺部感染真菌,毛癬菌屬,致病菌種:13種紅色毛癬菌石膏樣毛癬菌絮狀表皮癬菌

5、侵犯部位：皮膚、指（趾）甲，毛發(fā)疾?。后w癬、足癬、手癬、股癬、甲癬、頭癬特征： 大分生孢子：細長、薄壁、棒狀、兩端鈍圓 小分生孢子：側(cè)生、散在或葡萄狀,,,侵犯皮膚和指（趾）甲常見皮膚癬菌,3．小孢子癬菌屬：有15個種，對人致病的8種，常見的致病菌有鐵銹色小孢子菌、石膏樣小孢子菌、犬小孢子菌等,第一節(jié) 淺部感染真菌,3．小孢子癬菌屬：鏡下可見菌絲、厚壁梭形大分生孢子,第一節(jié) 淺部感染真菌,絮狀表皮癬菌,石膏樣毛癬菌

6、,石膏樣小孢子菌,（二）微生物學(xué)檢驗1．標(biāo)本采集 采集皮屑、甲屑、病發(fā) 2．檢驗方法 ?直接鏡檢：查找菌絲和孢子 ?分離培養(yǎng)與鑒定：觀察菌落顏色和形態(tài)；毛發(fā)穿孔試驗、脲酶試驗和特殊營養(yǎng)需要試驗,第一節(jié) 淺部感染真菌,（三）臨床意義 皮膚癬真菌是臨床上最常見的淺部感染真菌，有嗜角蛋白的特性，其侵犯部位限于角化的表皮、毛發(fā)和指（趾）甲，由于真菌在局部的增殖及其代謝產(chǎn)物的刺激產(chǎn)生病理反應(yīng)，即皮膚癬癥。

7、一種癬菌可引起多種病變，同一部位的病變可由不同的癬菌引起 我國以紅色毛癬菌為最多。,第一節(jié) 淺部感染真菌,二、表面感染真菌秕糠馬拉色菌：侵犯皮膚角質(zhì)層可引起皮膚表面出現(xiàn)黃褐色的花斑癬。鏡下可見臘腸樣有隔菌絲和圓形厚壁孢子,第一節(jié) 淺部感染真菌,（一）微生物學(xué)檢驗 1.標(biāo)本的采集：透明膠帶粘貼取材法2.顯微鏡檢查：可見圓形或卵圓形孢子3.分離培養(yǎng)：好脂性（需加入橄欖油等） 菌 落：乳酪色酵母型（二）臨床

8、意義糠秕馬拉色菌系存在于皮膚表面的嗜脂性酵母。感染原因：內(nèi)在因素和外在因素。,三、皮下組織感染真菌著色真菌和孢子絲菌是引起皮下組織感染的常見真菌（一）著色真菌著色真菌是一類在分類上接近，引起的臨床癥狀也相似的真菌的總稱。經(jīng)破損皮膚而感染，引起病損的皮膚變黑，產(chǎn)生著色真菌病,著色真菌病,第一節(jié) 淺部感染真菌,（一）著色真菌1.微生物學(xué)檢驗（1）顯微鏡檢查：厚壁孢子，分泌物鏡檢陽性率高（2）分離培養(yǎng)：菌落從灰黑色至黑色，菌絲

9、有分隔，呈棕色，可見三種分生孢子：樹枝型、劍頂型和花瓶型。,（一）著色真菌菌落從灰黑色至黑色，有絨毛狀或天鵝絨狀氣生菌絲,第一節(jié) 淺部感染真菌,（一）著色真菌鏡檢可見單個或成群的厚壁孢子，有橫隔。,第一節(jié) 淺部感染真菌,（一）著色真菌2.臨床意義著色真菌經(jīng)破損皮膚而感染，引起病損的皮膚變黑，產(chǎn)生著色真菌病。皮損初起的表現(xiàn)為紅色丘疹，逐漸演變成斑塊結(jié)節(jié)，最終形成菜花狀或乳頭瘤樣而明顯高出正常皮膚。損害常因外傷或繼發(fā)感染后破潰形

10、成潰瘍。皮損之間可見少許膿性分泌物，常發(fā)出難聞的臭味。若取該分泌物直接涂片鏡檢，往往可以查見棕黃色圓形厚壁的真菌孢子,（二）孢子絲菌孢子絲菌廣泛分布于土壤、植物和木材上，腐生真菌，常因外傷感染，引起孢子絲病。主要的病原菌是申克孢子絲菌，主要通過微小傷口侵入皮膚，引起孢子絲菌性下疳一種雙相性真菌,孢子絲菌下疳,第一節(jié) 淺部感染真菌,（二）申克孢子絲菌25 ℃培養(yǎng)，形成絲狀菌落，鏡下可見分枝菌絲及小分生孢子。,第一節(jié) 淺部感染真菌

11、,（二）申克孢子絲菌37 ℃培養(yǎng)，形成酵母型菌落，鏡下可見梭形孢子。,第一節(jié) 淺部感染真菌,1.微生物學(xué)檢驗（1）顯微鏡檢驗（2）分離培養(yǎng)（3）抗體檢測：滴度≥320有診斷意義（4）動物試驗2.臨床意義：孢子絲菌性下疳,深部感染真菌是能侵害人體深部組織和內(nèi)臟以及相起全身感染的真菌。 條件致病性真菌：假絲酵母菌、曲霉菌、毛霉菌和卡氏肺孢菌 致病性真菌：新型隱球菌、組織孢漿菌、球孢子菌、芽生菌、副球孢子菌。,第二節(jié)

12、深部感染真菌,假絲酵母菌屬，俗稱念珠菌?？汕址钙つw、粘膜和內(nèi)臟，表現(xiàn)為急性、亞急性或慢性炎癥，大多為繼發(fā)性感染。假絲酵母菌種類很多，有150多個種，但能對人致病的有11種，以白假絲酵母菌，即白色念珠菌最常見，致病力也最強，其次為熱帶假絲酵母菌，其它還有克柔假絲酵母菌、近平滑假絲酵母菌和偽熱帶假絲酵母菌等。白假絲酵母菌通常存在于人的口腔、上呼吸道、腸道及陰道粘膜。機體抵抗力下降或菌群失調(diào)是其侵入機體的主要原因。,一、白假絲酵母菌（一

13、）生物學(xué)特性在沙培養(yǎng)基上呈類酵母型菌落，菌體呈圓形或卵圓形，G+，可形成假菌絲、厚膜孢子。,第二節(jié) 深部感染真菌,（二）微生物學(xué)檢驗1．標(biāo)本采集 分泌物、痰、尿、糞、血或腦脊液等2．檢驗方法 ?直接鏡檢 ?分離培養(yǎng) ?鑒定試驗：芽管形成試驗、厚膜孢子形成試驗、TTC試驗、糖同化或發(fā)酵試驗,第二節(jié) 深部感染真菌,芽管形成試驗,方法： 待測菌+0.5～1ml血清,37℃水浴2～3小時,,鏡檢,應(yīng)用：白假絲

14、酵母菌的鑒定,結(jié)果：絕大部分白假絲酵母菌可形成典型的放大鏡柄狀芽管,芽管,第二節(jié) 深部感染真菌,厚膜孢子形成試驗,接種,玉米粉吐溫-80瓊脂,25℃孵育1～3天,待測菌,每天于顯微鏡下觀察,應(yīng)用：白假絲酵母菌的鑒定,,方法：,,結(jié)果：白假絲酵母菌在72小時內(nèi)可觀察到豐富的假菌絲，假菌絲頂端見1～2個厚膜孢子,第二節(jié) 深部感染真菌,糖同化或發(fā)酵試驗,（二）微生物學(xué)檢驗?其他檢測 ?藥敏試驗,第二節(jié) 深部感染真菌,（三

15、）臨床意義可引起：①皮膚假絲酵母菌?。虎陴つぜ俳z酵母菌?。虎蹆?nèi)臟假絲酵母菌?。虎苤袠猩窠?jīng)系統(tǒng)白假絲酵母菌病。,第二節(jié) 深部感染真菌,二、新型隱球菌 隱球菌屬包括17個種和8個變種，其中僅新型隱球菌及其變種具有致病性。（一）生物學(xué)特性又稱溶組織酵母菌，墨汁負染色后，可見圓形或卵圓形菌體，外周有寬厚莢膜，形成酵母型菌落,第二節(jié) 深部感染真菌,（二）微生物學(xué)檢驗1．標(biāo)本采集 腦脊液、痰液、尿液、膿汁等。2．檢驗方法

16、?直接鏡檢 ?分離培養(yǎng) ?鑒定試驗 ：酚氧化酶試驗、脲酶試驗、糖同化及發(fā)酵試驗。 ?其他檢測 ?藥敏試驗,第二節(jié) 深部感染真菌,（三）臨床意義經(jīng)呼吸道侵入人體，引起肺部感染。由肺經(jīng)血行播散時可引起亞急性或慢性腦膜炎,肺新型隱球菌感染,第二節(jié) 深部感染真菌,（一）曲霉1.生物學(xué)特性在沙保培養(yǎng)基上形成絲狀菌落，由于產(chǎn)生分生孢子而漸呈現(xiàn)不同顏色,第三節(jié) 其他重要真菌,第三節(jié) 其他重要真菌,（一）曲霉鏡下可見菊花樣的分生

17、孢子頭，因菌種不同而呈不同顏色,第三節(jié) 其他重要真菌,（一）曲霉2.微生物學(xué)檢驗（1）直接鏡檢（2）分離培養(yǎng)（3）血清學(xué)試驗：抗原、抗體、代謝產(chǎn)物檢測 3.臨床意義 可侵犯機體的許多部位，引起曲霉病。,第三節(jié) 其他重要真菌,（一）曲霉曲霉可引起呼吸系統(tǒng)曲霉病、全身性曲霉病。,第三節(jié) 其他重要真菌,（二）毛霉在沙保培養(yǎng)基上形成絲狀菌落，鏡下可見孢子囊梗、孢子囊、孢子囊孢子。引起毛霉病,第二節(jié) 深部感染真菌,

18、（二）毛霉毛霉病是由毛霉目的根霉屬、毛霉屬、梨頭霉屬或被孢霉屬等多種真菌引起的一種發(fā)病急、發(fā)展快、病死率高的系統(tǒng)性真菌感染，少數(shù)為慢性感染?？赏ㄟ^呼吸道、消化道、皮膚或皮膚黏膜交界進入人體，好侵犯動脈血管，引起血栓、組織缺血、梗死和壞死。,第二節(jié) 深部感染真菌,（三）莢膜組織胞漿菌是一種侵犯單核─吞噬細胞系統(tǒng)的雙相型真菌。在沙保培養(yǎng)基上25℃培養(yǎng)形成絲狀菌落，鏡下可見特征性的齒輪狀大分生孢子。,第三節(jié) 其他重要真菌,（四）卡氏肺

19、孢菌姬姆薩染色，可見孢囊內(nèi)的8個孢子；亞甲胺藍染色，孢囊囊壁呈深褐色或黑色，孢子不著色。 是條件致病菌，引起卡氏肺孢菌性肺炎。,第三節(jié) 其他重要真菌,分 布：自然界及人和多種哺乳動物肺內(nèi)卡氏肺孢菌單細胞型，兼具原蟲及酵母菌特點發(fā) 育：滋養(yǎng)體（小滋養(yǎng)體，大滋養(yǎng)體） 囊前期 孢囊,第三節(jié) 其他重要真菌,致病性 機體免疫力下降時可引起肺孢子菌肺炎 （pneumocystis