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文檔簡介
1、Ectoines(1,4,5,6-四氫-2-甲基-4-嘧啶羧酸,Ectoine;1,4,5,6-四氫-2-甲基-5-羥基-4-嘧啶羧酸,Hydroxyectoine)是中度嗜鹽菌在滲透壓脅迫下合成的一類滲透壓補償溶質(zhì)。Ectoines在高溫、冷凍和干燥等逆環(huán)境下,對酶、蛋白質(zhì)、核酸及整個細胞具有保護作用,被廣泛應用于化妝品、生物制劑穩(wěn)定劑、藥物制劑等領(lǐng)域的研究與應用,Ectoines的制備技術(shù)日益受到關(guān)注。本文分離鑒定Ectoines合
2、成菌株,獲得了Ectoine分泌型菌株和耐受滲透壓沖擊的Hydroxyectoine合成菌株。研究高效制備Ectoines的新工藝。同時研究了Ectoine在高濃度乙醇發(fā)酵中的應用。
從鹽場鹽池中分離篩選獲得了22株Ectoines合成菌株。HPLC方法檢測到了菌株DLB06和DLS12的發(fā)酵培養(yǎng)基中存在Ectoine特征峰物質(zhì)。菌株DLC31經(jīng)HPLC和1H-NMR鑒定合成Hydroxyectoine,生理生化鑒定該菌株
3、為Cobetiamarina??寺×薈.marina的Ectoine合成酶基因,并進行了基因結(jié)構(gòu)分析。
HPLC和LC-MS方法發(fā)現(xiàn)并確認了分離菌株DLB06和DLS12的Ectoine分泌現(xiàn)象??疾炝薔aCl濃度對菌株DLS12Ectoine分泌的影響。Ectoine分泌量隨NaC1濃度的降低而升高。菌株DLS12對NaCl脅迫的應答、Ectoine合成濃度閾值等與已有文獻報道的菌株顯著不同,是Ectoine合成菌株的一
4、個新類型。10L發(fā)酵罐Eetoine分批發(fā)酵,Ectoine分泌型菌株DLS12的Ectoine總合成濃度是H.elongataDSM2581總合成濃度的2.7倍。
本文分離鑒定的C.marina,耐受滲透壓沖擊,適合細菌擠奶工藝條件,利用該菌株進行的Hydroxyectoine細菌擠奶,制備效率較分批發(fā)酵提高了71.9%,Hydroxyectoine對底物的轉(zhuǎn)化率是分批發(fā)酵的2.5倍。
高葡萄糖濃度對Zym
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