辛伐他汀干預(yù)骨質(zhì)疏松大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞后microRNA的差異表達(dá)研究.pdf

1、目的:探討在microRNA(miRNA)水平,辛伐他汀促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞成骨的可能機(jī)制及骨質(zhì)疏松癥發(fā)生的可能機(jī)制。
　　 方法:將3月齡SD大鼠隨機(jī)分成2組,卵巢切除組及假手術(shù)組,每組10只。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后手術(shù)(卵巢切除組經(jīng)腹腔切除雙側(cè)卵巢,假手術(shù)組同樣的方法在雙側(cè)卵巢附近取等量的脂肪組織)。術(shù)后12周經(jīng)確認(rèn)骨質(zhì)疏松模型建立成功后,取股骨、脛骨骨髓腔細(xì)胞,全骨髓培養(yǎng)法培養(yǎng)離體骨髓基質(zhì)細(xì)胞。骨髓基質(zhì)細(xì)胞擴(kuò)增至第三代時(shí),細(xì)胞分為三

2、個(gè)處理組:骨質(zhì)疏松骨髓基質(zhì)細(xì)胞+辛伐他汀組(OP+SIM)、骨質(zhì)疏松骨髓基質(zhì)細(xì)胞組(OP+K)、正常骨髓基質(zhì)細(xì)胞組(N+K)。培養(yǎng)第1～7天以MTT法測(cè)量各組細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線；第10天時(shí)檢測(cè)各組細(xì)胞的堿性磷酸酶活性及骨鈣素含量,并抽提各樣本的RNA行miRNA芯片檢測(cè)；培養(yǎng)第14天時(shí)行vonkossa染色觀察各組細(xì)胞的體外誘導(dǎo)礦化能力；最后根據(jù)miRNA芯片的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行GO功能分析及Pathway分析研究辛伐他汀促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞成骨的可

3、能機(jī)制及骨質(zhì)疏松癥發(fā)生的可能機(jī)制。
　　 結(jié)果:(1)在三組細(xì)胞中,骨質(zhì)疏松骨髓基質(zhì)細(xì)胞+辛伐他汀組的堿性磷酸酶活性、骨鈣素含量均明顯高于另外兩組(P<0.05),正常骨髓基質(zhì)細(xì)胞組次之,骨質(zhì)疏松骨髓基質(zhì)細(xì)胞組最低。(2)miRNA芯片檢測(cè):骨質(zhì)疏松骨髓基質(zhì)細(xì)胞+辛伐他汀組與骨質(zhì)疏松骨髓基質(zhì)細(xì)胞組相比較,有20種miRNA表達(dá)上調(diào),27種miRNA表達(dá)下調(diào)；骨質(zhì)疏松骨髓基質(zhì)細(xì)胞組與正常骨髓基質(zhì)細(xì)胞組相比較,有27種miRNA表達(dá)