阿司匹林治療大鼠絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、二、研究目的
　　1．建立大鼠骨質(zhì)疏松模型并評價(jià)模型的有效性。
　　2.采用“血液生化－微觀結(jié)構(gòu)－宏觀密度－力學(xué)強(qiáng)度”的方法，評估阿司匹林治療對提高骨密度、骨小梁微觀結(jié)構(gòu)及力學(xué)強(qiáng)度的能力，確定其是否具有治療骨質(zhì)疏松的作用；并進(jìn)一步探討其相關(guān)作用機(jī)制。
　　三、研究內(nèi)容和方法
　　第一部分大鼠骨質(zhì)疏松模型的建立與有效性評定
　　采用隨機(jī)對照研究方法，將16只SD大鼠隨機(jī)分為2組，每組8只，分別為假手術(shù)對照組（

2、Sham）、卵巢切除去勢實(shí)驗(yàn)組（OVX）。所有動(dòng)物術(shù)前均采用雙能X線吸收骨密度儀測定腰椎及股骨髁這兩部分的骨密度。在術(shù)后3個(gè)月時(shí)：①比較兩組大鼠的體重及子宮濕重；②用組織病理學(xué)方法觀察股骨髁部的骨小梁；③用DXA測定動(dòng)物腰椎骨和股骨髁骨密度；④MicroCT重建分析L4椎體松質(zhì)骨骨小梁的三維結(jié)構(gòu)；⑤用生物力學(xué)方法比較Sham組和OVX組椎體和股骨干力學(xué)強(qiáng)度。
　　第二部分阿司匹林治療大鼠絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的實(shí)驗(yàn)研究
　　采用隨機(jī)

3、對照研究方法，將40只SD大鼠隨機(jī)分為5組，每組8只，分別為假手術(shù)對照組（Sham）、去勢對照組（OVX）、低劑量阿司匹林實(shí)驗(yàn)組（A1）、中劑量阿司匹林實(shí)驗(yàn)組（A2）、高劑量阿司匹林實(shí)驗(yàn)組（A3）。所有動(dòng)物術(shù)前及術(shù)后均采用雙能X線吸收骨密度儀測定腰椎骨密度。OVX及實(shí)驗(yàn)組采用卵巢切除法去勢，飼養(yǎng)3個(gè)月建立骨質(zhì)疏松模型。雙能X線吸收骨密度儀再次測定腰椎骨密度，證實(shí)模型建立成功后予灌胃治療，A1、A2及A3治療組分別為阿司匹林給藥組：8.9

4、3、26.79及80.36mg/kg，每天灌胃一次。灌胃3個(gè)月時(shí)測量指標(biāo)：①采用DXA測定所有動(dòng)物腰椎骨密度；②測外圍血堿性磷酸酶、骨鈣素濃度；③采用組織病理學(xué)切片方法對股骨髁部骨小梁結(jié)構(gòu)進(jìn)行組織病理學(xué)觀察；④MicroCT重建分析L4椎體松質(zhì)骨骨小梁的三維結(jié)構(gòu)；⑤運(yùn)用生物力學(xué)方法比較Sham組與OVX組的椎體與股骨干力學(xué)強(qiáng)度。
　　四、研究結(jié)果
　　第一部分：去勢3個(gè)月后，OVX組大鼠的體重明顯高于Sham組(P<0.05

5、)，而OVX組大鼠子宮濕重卻明顯輕于Sham組(P<0.05)。DXA分析顯示：去勢3個(gè)月時(shí)OVX組的椎體及股骨髁部BMD明顯低于Sham組(P<0.05)，OVX組的椎體及股骨髁部BMD較術(shù)前平均下降分別為18.34％和21.76％。組織學(xué)切片觀察發(fā)現(xiàn)：去勢3個(gè)月后，Sham組股骨髁部松質(zhì)骨骨小梁結(jié)構(gòu)完整，呈圓形或橢圓形拱形結(jié)構(gòu)，而OVX組骨小梁明顯稀疏、變細(xì)，局部存在骨小梁骨折及骨缺損。MicroCT分析表明：OVX組椎體骨小梁厚度

6、、骨小梁數(shù)量、連接率及骨密度均顯著低于Sham組(P<0.05)。生物力學(xué)研究顯示：OVX組腰椎壓縮載荷及股骨干三點(diǎn)彎曲載荷均顯著低于Sham組(P<0.05)。
　　第二部分：阿司匹林灌胃治療3個(gè)月時(shí)，DXA分析顯示：阿司匹林治療組椎體的BMD明顯高于OVX組(P<0.05)，以高濃度阿司匹林治療組（A3組）BMD升高最為明顯，與Sham組相比無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。外圍血檢測示：阿司匹林治療組的堿性磷酸酶明顯低于OV

7、X組(P<0.05)，而骨鈣素水平與OVX組無明顯差別(P>0.05)。組織病理學(xué)結(jié)果表明：阿司匹林治療組股骨髁部松質(zhì)骨骨小梁的連接、粗細(xì)較OVX組好。MicroCT分析表明：阿司匹林治療組椎體骨小梁厚度、骨小梁數(shù)量及骨密度均顯著高于OVX組(P<0.05)，并且A3組與Sham組最為相近(P>0.05)。生物力學(xué)結(jié)果顯示：阿司匹林治療組腰椎壓縮載荷及股骨干三點(diǎn)彎曲載荷均明顯高于OVX組(P<0.05)。
　　五、結(jié)論