熱量限制對(duì)大鼠下丘腦和垂體組織電壓依賴性鈣通道表達(dá)的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的：上世紀(jì)90年代以來發(fā)現(xiàn)熱量限制可以延長(zhǎng)線蟲，果蠅及大鼠的壽命，而機(jī)體衰老最突出的表現(xiàn)之一就是神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)功能紊亂，作為和內(nèi)分泌系統(tǒng)關(guān)系最為密切的中樞神經(jīng)組織下丘腦和垂體，執(zhí)行著把神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)信號(hào)聯(lián)系在一起的重要功能。電壓依賴性鈣通道在激素分泌和激素對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)信號(hào)傳遞過程中均起到了極為重要的作用。為此本課題通過研究熱量限制大鼠的下丘腦和垂體組織中鈣通道的基因表達(dá)變化，來揭示神經(jīng)內(nèi)分泌的聯(lián)動(dòng)作用，進(jìn)而闡明熱量限制延緩衰老

2、在神經(jīng)與內(nèi)分泌方面的機(jī)制。 方法：建立熱量限制的大鼠CR模型，動(dòng)物分為2組，分為給予隨意飲食即（Ad libitum，AL）組和60％飼料的（Calorie restriction，CR)組，限食8個(gè)月后測(cè)量大鼠體重變化及血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的水平，采用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)(real-time PCR)、免疫印跡技術(shù)(Western blotting)和免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)下丘腦和垂體組織中L型、T型、

3、N型、R型和P/Q型五種鈣通道亞型的基因表達(dá)變化。 結(jié)果：經(jīng)過8個(gè)月熱量限制，CR大鼠體重明顯低于AL組；MDA水平CR組較AL組明顯減少，SOD活性兩組無(wú)明顯差別；五種鈣通道的基因和蛋白表達(dá)均有所下降，在下丘腦，N型、R型有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，在垂體N型、T型和R型有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)論：CR后大鼠下丘腦和垂體的L型、T型、N型、R型和P/Q型五種鈣通道的mRNA水平和蛋白表達(dá)均有所下調(diào)，在長(zhǎng)期饑餓應(yīng)激過程中，leptin，in