重慶地區(qū)動(dòng)物與人BDV感染的分子生物學(xué)研究.pdf

1、第一部分重慶地區(qū)家雞和家鴨博爾納病病毒自然感染狀況研究目的：為了探討重慶地區(qū)家雞和家鴨博爾納病病毒(BDV)的自然感染狀況，分析重慶地區(qū)家雞和家鴨自然感染的BDVp24核苷酸序列與國(guó)外人和動(dòng)物來(lái)源BDV分離株及其標(biāo)準(zhǔn)株StrainV和He／80的同源性。方法：本研究采用熒光定量巢式逆轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-nRT-PCR)檢測(cè)重慶地區(qū)120例家雞和120例家鴨外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)中BDVp24基因片段，并對(duì)陽(yáng)性樣本的熒光定量

2、聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-PCR)產(chǎn)物進(jìn)行基因序列測(cè)定，測(cè)序結(jié)果與國(guó)外人與動(dòng)物來(lái)源的BDV分離株及其標(biāo)準(zhǔn)株StrainV和He／80進(jìn)行序列比較。結(jié)果：家雞PBMCs中BDVp24基因片段陽(yáng)性率為1．67％(2／120)，家鴨PBMCs中BDVp24基因片段陽(yáng)性率為0％(O／120)。重慶地區(qū)家雞感染的BDV的p24核苷酸序列與國(guó)外患病馬源BDV分離株H1766同源性最高，為96．51％，與標(biāo)準(zhǔn)株StrainV和He／80同源性均為95．35

3、％。結(jié)論：重慶地區(qū)家雞中存在動(dòng)物源性BDV自然感染，其感染的BDVp24核苷酸序列與動(dòng)物來(lái)源的BDVH1766株及其標(biāo)準(zhǔn)株StrainV和He／80存在高度的同源性。本研究不支持重慶地區(qū)家鴨中存在BDV自然感染。第二部分重慶地區(qū)山羊博爾納病病毒自然感染狀況研究目的：探討中國(guó)重慶地區(qū)山羊BDV的自然感染狀況，比較分析中國(guó)重慶地區(qū)山羊自然感染BDVp24基因序列與國(guó)外人和動(dòng)物來(lái)源BDV分離株及其標(biāo)準(zhǔn)株StrainV和He／80的同源性。方法

4、：采用FQ-nRT-PCR檢測(cè)了中國(guó)重慶地區(qū)60例山羊PBMCs中和大腦組織(左側(cè)海馬)BDVp24基因片段，對(duì)陽(yáng)性標(biāo)本FQ-PCR產(chǎn)物進(jìn)行基因序列測(cè)定，測(cè)序結(jié)果與國(guó)外人與動(dòng)物來(lái)源的BDV分離株以及標(biāo)準(zhǔn)株StrainV和He／80進(jìn)行序列比較。結(jié)果：山羊外周血組BDVp24基因片段陽(yáng)性率為8．3％(5／60)，腦組織組BDVp24基因片段陽(yáng)性率為lO％(6／60)。山羊外周血組陽(yáng)性率高于腦組織組，但兩組之間差異無(wú)顯著性意義(P>O．05

5、)。測(cè)序分析結(jié)果表明，重慶地區(qū)山羊感染的BDVp24的核苷酸序列與國(guó)外患病馬源BDV分離株H1766同源性最高，為96．51％，與標(biāo)準(zhǔn)株StrainV和He／80同源性為95．35％。結(jié)論：重慶地區(qū)山羊中存在動(dòng)物源性BDV自然感染，該地區(qū)感染的BDVp24核苷酸序列與標(biāo)準(zhǔn)株StrainV和He／80存在高度的同源性。外周血組和腦組織組的檢出結(jié)果高度吻合，在運(yùn)用FQ-nRT-PCR檢測(cè)山羊的BDV感染時(shí)可以用外周血標(biāo)本代替腦組織標(biāo)本。第三

6、部分博爾納病病毒感染與精神病發(fā)病的關(guān)系研究目的：探討重慶地區(qū)精神分裂癥(schizophrenia，SCH)患者和抑郁癥(depressivedisorder，DD)患者BDV自然感染狀況及BDV感染與SCH發(fā)病和DD發(fā)病之間的關(guān)系。方法：采用FQ-nRT-PCR檢測(cè)了60例SCH患者、60例DD患者和120例健康人PBMCs中BDVp24基因片段，對(duì)陽(yáng)性標(biāo)本的FQ-PCR產(chǎn)物進(jìn)行克隆和基因序列測(cè)定，測(cè)序結(jié)果同國(guó)外人和動(dòng)物來(lái)源的BDV分

7、離株以及其標(biāo)準(zhǔn)株StrainV和He／80進(jìn)行序列比較。結(jié)果：SCH組BDVp24基因片段陽(yáng)性率為6．67％(4／60)；DD組BDVp24基因片段陽(yáng)性率為5％(3／60)；健康組陽(yáng)性率為O％(O／120)。SCH組陽(yáng)性率高于健康組，差異有顯著性意義(P