西維來司鈉對球囊損傷后Wistar大鼠動脈中膜遷徙平滑肌細胞mRNA表達的研究.pdf

1、目的： 在動脈粥樣硬化形成的過程中，中膜遷徙平滑肌細胞向內(nèi)膜遷徙并在內(nèi)膜增殖是極其重要的現(xiàn)象。球囊導管所致的動脈損傷和內(nèi)膜肥厚的發(fā)生機制中，中膜平滑肌細胞的損傷是關鍵。本研究擬利用球囊損傷Wistar大鼠動脈模型，追蹤損傷動脈中膜遷徙平滑肌細胞mRNA隨時間變化的表達及西維來司鈉對這一過程及其相關因素的影響，探討西維來司鈉對損傷動脈的中膜遷徙平滑肌細胞mRNA影響程度與內(nèi)膜肥厚的關系。 方法： 選用60只Wist

2、ar大鼠(雄性，12周，250g±20g)，將它們的頸總動脈用球囊導管損傷做成損傷模型，隨機法分成對照組，持續(xù)給藥組，5日止給藥組和5日始給藥組共四組，除5日始給藥組外，其他三組分別于術前一天開始投藥，對照組給與生理鹽水，5日止給藥組和持續(xù)給藥組給與西維來司鈉鹽溶液，5日始給藥組在術后第5天給西維來司鈉鹽溶液。除5日止給藥組于第5天停藥，其余三組于術后14天停藥。四組術后于1、3、5、7、14天分批處死大鼠。處死前30分鐘，按50mg/

3、kg體重靜脈注射5-Bromodeoxyuridine(BrdU)。然后應用大鼠胰腺彈性蛋白酶Ⅱ的克隆，原位雜交與免疫組化雙重染色，測定動脈損傷后各時期給藥中膜BrdU標記彈性蛋白酶mRNA在動脈中膜平滑肌細胞表達的陽性細胞率。同時進行內(nèi)膜-中膜厚度/內(nèi)徑比的測定。 結(jié)果： 對照組BrdU標記mRNA表達陽性細胞率在1-5天增高明顯，以后逐漸下降。持續(xù)給藥組，5日止給藥組BrdU標記mRNA表達陽性細胞率在1-5天增高緩

4、慢，與對照組相比存在明顯統(tǒng)計學差異；而持續(xù)給藥組與5日止給藥組相比無明顯統(tǒng)計學差異；5日始給藥組在1-5天出現(xiàn)峰性增高，5天后下降，與對照組無明顯統(tǒng)計學差異。在內(nèi)膜-中膜厚度/內(nèi)徑比的測定上，持續(xù)給藥組和5日止給藥組測定比值低于對照組，且與對照組有明顯統(tǒng)計學差異，5日始給藥組與對照組在測定比值上無明顯統(tǒng)計學差異。 結(jié)論： 對照組BrdU標記mRNA表達陽性細胞率在1-5天增高明顯，說明損傷后5日內(nèi)為動脈中膜遷徙性平滑肌細

5、胞增殖的時期，可以稱之為增殖期。持續(xù)給藥組，5日止給藥組BrdU標記mRNA表達陽性細胞率在1-5天增高緩慢，說明西維來司鈉通過抑制彈性蛋白酶，從而抑制中膜遷徙性平滑肌細胞的增殖，使持續(xù)給藥組與5日止給藥組mRNA表達減弱；而持續(xù)給藥組與5日止給藥組相比無明顯統(tǒng)計學差異，說明西維來司鈉全程用藥和損傷后5日內(nèi)用藥效果相同，進一步說明該藥主要作用于損傷后5日內(nèi)，即增殖期用藥。5日始給藥組在1-5天出現(xiàn)峰性增高，5天后下降，與對照組無明顯統(tǒng)計