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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察正畸用鎳鈦弓絲在不同含氟濃度的人工唾液環(huán)境下的細(xì)胞毒性的改變,評(píng)價(jià)氟化物對(duì)正畸用鎳鈦弓絲生物相容性的影響,為氟化物在正畸治療中安全有效地使用提供參考。
方法:
1、配制人工唾液和三種不同含氟濃度(0.05%、0.10%、0.20%)的人工唾液,選擇直徑為0.018英寸的國(guó)產(chǎn)鎳鈦絲(有研億金牌,原北京有色金屬研究總院產(chǎn))剪成3厘米長(zhǎng)的小段作為實(shí)驗(yàn)樣本,共制備80個(gè)樣本。將它們分為(A,
2、B,C,D)四個(gè)組,每組20個(gè)樣本,在37℃人工唾液環(huán)境中浸泡28天。取出(B,C,D)三組樣本依次浸入含氟濃度為(0.05%、0.10%、0.20%)的人工唾液,3分鐘后取出,蒸餾水清洗后用濾紙吸干再放回原人工唾液中,每日早中晚各一次。A組為對(duì)照組樣本,直接浸泡在人工唾液中不做此處理。
2、28天后將以上四組樣本從人工唾液中取出,消毒干燥后加入RPMI-1640培養(yǎng)基,制備浸提液。將以上四組浸提液和陰性對(duì)照液、陽(yáng)性對(duì)照液
3、分別進(jìn)行L929小鼠成纖維細(xì)胞培養(yǎng),培養(yǎng)48小時(shí)后對(duì)細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行觀察,并采用MTT法測(cè)定各組吸光值,計(jì)算相對(duì)增殖率,以評(píng)價(jià)各組材料的細(xì)胞毒性。采用流式細(xì)胞AnnexinV-FTTC/PI雙染法對(duì)各組浸提液培養(yǎng)的L929小鼠成纖維細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),觀察各組正常細(xì)胞、早期凋亡細(xì)胞、晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞的分布差異,并繪制散點(diǎn)圖。
結(jié)果:
1.MTT結(jié)果顯示A組(弓絲未經(jīng)氟化處理)的細(xì)胞毒性為1級(jí);B組和C組(弓絲分別
4、經(jīng)0.05%和0.10%氟化人工唾液處理組)的細(xì)胞毒性均為1級(jí);D組(弓絲經(jīng)0.20%氟化人工唾液處理組)的細(xì)胞毒性為2級(jí);陰性對(duì)照組為0級(jí);陽(yáng)性對(duì)照組為4級(jí)。
2.流式細(xì)胞儀散點(diǎn)圖顯示,陰性組中細(xì)胞主要為正?;罴?xì)胞;A、B和C組(弓絲未經(jīng)氟化處理組、弓絲分別經(jīng)0.05%和0.10%氟化人工唾液處理組)中細(xì)胞主要為正常細(xì)胞和早期凋亡細(xì)胞;D組(弓絲經(jīng)0.20%氟化人工唾液處理組)中細(xì)胞狀態(tài)己發(fā)生較大改變,主要為早期凋亡細(xì)胞
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