野生二粒小麥活性1Ay基因向普通小麥轉(zhuǎn)移的動態(tài)變化研究.pdf

1、本研究通過SDS-PAGE對來自以色列的野生二粒小麥(Triticumdicoccoides，2n=4x=28，AABB)高分子谷蛋白亞基(HMW-GS)檢測發(fā)現(xiàn)，在133份材料中有55份(41.35％)表達(dá)1Ay亞基。以普通小麥川農(nóng)16為母本與野生二粒小麥雜交，應(yīng)用分子生物學(xué)與細(xì)胞遺傳學(xué)相結(jié)合的方法進(jìn)行研究，所得結(jié)果如下：　　1.對雜交F3代單株收獲的種子進(jìn)行SDS-PAGE分析，發(fā)現(xiàn)其HMW-GS帶型豐富，出現(xiàn)了雙親都沒有的帶型，

2、有的條帶數(shù)甚至多于正常的6條；并檢測到HMW-GS帶型一致不分離的株系。　　2.對雙親川農(nóng)16和野生二粒小麥D1及其雜交F3代HMW-GS不分離的有1Ay表達(dá)和無1Ay表達(dá)的基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，電泳結(jié)果顯示，野生二粒小麥HMW-GS中1Ay亞基相對應(yīng)的條帶大約為1800-1900bp，此帶紋在親本川農(nóng)16及其與D1雜交F3代(2n=42)植株所產(chǎn)生的籽粒中也存在。　　3.將野生二粒小麥D1的核苷酸序列1964(TaKaRa測

3、序號)測定結(jié)果與已知1Ay型亞基氨基酸序列，進(jìn)行信號肽、N端、C端的同源性比較，結(jié)果1964與1Ay型亞基氨基酸序列具有高度一致性，其N端具有典型的y型高分子量麥谷蛋白亞基所具有的5個(gè)半胱氨酸殘基，因此確定1964為1Ay型亞基。　　4.對于有1Ay表達(dá)的和沒有1Ay的HMW-GS不分離的株系進(jìn)行根尖細(xì)胞有絲分裂染色體觀察。結(jié)果在1Ay表達(dá)的后代株系中沒找到染色體數(shù)目為2n=42的普通小麥染色體組型，其染色體數(shù)目通常是2n=28(野生