普通小麥中鹽脅迫誘導表達基因的鑒定.pdf

1、鹽堿脅迫是環(huán)境脅迫的一種，由于該脅迫的普遍存在性，以及近年來土壤鹽漬化不斷加劇的情況，而成為限制農(nóng)作物產(chǎn)量的主要因素之一。大量研究表明，鹽堿脅迫降低了植株的干鮮重、減少了其葉面積、根系活力、相對生長量等指標，從而導致其產(chǎn)量的下降，因此提高作物的耐鹽特性、培育耐鹽品種，是現(xiàn)階段育種工作者的重要目標。小麥是產(chǎn)量僅次于玉米的世界第二大糧食作物，同時也是一種淡土作物，其耐鹽特性的研究對世界農(nóng)業(yè)發(fā)展具有舉足輕重的意義。本研究中首先對不同小麥品種(

2、系)的耐鹽生理指標進行測量，然后通過表達譜分析，進行耐鹽相關基因的篩選和鑒定，并對SAMS基因進行了較深層次的研究，為了解普通小麥的耐鹽機制提供了技術支持和理論依據(jù)。
　　 1.鹽脅迫下不同小麥品種(系)的生理指標，能夠有效的反應材料的耐鹽特性。本研究測定了搜集到的19個小麥品種(系)，在鹽處理下種子的萌發(fā)率、幼苗的電導率、根長、苗長、干重、鮮重等生理指標，根據(jù)測定結果又結合材料的親緣關系，選定了6個材料用于進一步的研究分析。<

3、br>　　 2.對選定的6個小麥材料，在水培條件下進行鹽脅迫處理，然后分別測定每個材料的地上部分和地下部分組織中的Na+和K+的含量，通過分析發(fā)現(xiàn)，所選定的4個耐鹽材料有三種不同的耐鹽機制。表明了所選定的小麥材料具有很好的代表性，是研究普通小麥耐鹽特性的合適材料。
　　 3.采用cDNA-AFLP的方法，在轉錄組水平上篩選多枝賴草與小麥的二體附加系Line15的鹽脅迫誘導表達基因。本研究中用了76對多態(tài)性良好的引物，挑出差異片

4、段TDF132條，經(jīng)測序分析發(fā)現(xiàn)有78個基因在植物的數(shù)據(jù)庫中存在同源序列，而對功能的分析表明，其中15個基因已被前人在不同物種中研究證明與鹽脅迫相關。
　　 4.采用熒光定量Real Time-PCR技術，對篩選得到的腺苷甲硫氨酸合成酶基因SAMS，進行鹽脅迫處理不同時間段的表達方式驗證。研究表明，SAMS基因在鹽脅迫處理24h時在六個材料中均有較大幅度的提升，而在材料Line15中的表達量尤其高。這表明了對Line15中SAM