普通小麥中鹽脅迫誘導(dǎo)表達(dá)基因的鑒定.pdf

1、鹽堿脅迫是環(huán)境脅迫的一種，由于該脅迫的普遍存在性，以及近年來(lái)土壤鹽漬化不斷加劇的情況，而成為限制農(nóng)作物產(chǎn)量的主要因素之一。大量研究表明，鹽堿脅迫降低了植株的干鮮重、減少了其葉面積、根系活力、相對(duì)生長(zhǎng)量等指標(biāo)，從而導(dǎo)致其產(chǎn)量的下降，因此提高作物的耐鹽特性、培育耐鹽品種，是現(xiàn)階段育種工作者的重要目標(biāo)。小麥?zhǔn)钱a(chǎn)量?jī)H次于玉米的世界第二大糧食作物，同時(shí)也是一種淡土作物，其耐鹽特性的研究對(duì)世界農(nóng)業(yè)發(fā)展具有舉足輕重的意義。本研究中首先對(duì)不同小麥品種(

2、系)的耐鹽生理指標(biāo)進(jìn)行測(cè)量，然后通過(guò)表達(dá)譜分析，進(jìn)行耐鹽相關(guān)基因的篩選和鑒定，并對(duì)SAMS基因進(jìn)行了較深層次的研究，為了解普通小麥的耐鹽機(jī)制提供了技術(shù)支持和理論依據(jù)。
　　 1.鹽脅迫下不同小麥品種(系)的生理指標(biāo)，能夠有效的反應(yīng)材料的耐鹽特性。本研究測(cè)定了搜集到的19個(gè)小麥品種(系)，在鹽處理下種子的萌發(fā)率、幼苗的電導(dǎo)率、根長(zhǎng)、苗長(zhǎng)、干重、鮮重等生理指標(biāo)，根據(jù)測(cè)定結(jié)果又結(jié)合材料的親緣關(guān)系，選定了6個(gè)材料用于進(jìn)一步的研究分析。<

3、br>　　 2.對(duì)選定的6個(gè)小麥材料，在水培條件下進(jìn)行鹽脅迫處理，然后分別測(cè)定每個(gè)材料的地上部分和地下部分組織中的Na+和K+的含量，通過(guò)分析發(fā)現(xiàn)，所選定的4個(gè)耐鹽材料有三種不同的耐鹽機(jī)制。表明了所選定的小麥材料具有很好的代表性，是研究普通小麥耐鹽特性的合適材料。
　　 3.采用cDNA-AFLP的方法，在轉(zhuǎn)錄組水平上篩選多枝賴(lài)草與小麥的二體附加系Line15的鹽脅迫誘導(dǎo)表達(dá)基因。本研究中用了76對(duì)多態(tài)性良好的引物，挑出差異片

4、段TDF132條，經(jīng)測(cè)序分析發(fā)現(xiàn)有78個(gè)基因在植物的數(shù)據(jù)庫(kù)中存在同源序列，而對(duì)功能的分析表明，其中15個(gè)基因已被前人在不同物種中研究證明與鹽脅迫相關(guān)。
　　 4.采用熒光定量Real Time-PCR技術(shù)，對(duì)篩選得到的腺苷甲硫氨酸合成酶基因SAMS，進(jìn)行鹽脅迫處理不同時(shí)間段的表達(dá)方式驗(yàn)證。研究表明，SAMS基因在鹽脅迫處理24h時(shí)在六個(gè)材料中均有較大幅度的提升，而在材料Line15中的表達(dá)量尤其高。這表明了對(duì)Line15中SAM