玉米花粉誘導普通小麥產(chǎn)生單倍體的研究.pdf

1、雙單倍體方法是一項已經(jīng)廣泛應用于小麥遺傳育種研究的生物技術。這種方法通過單倍體的產(chǎn)生，然后染色體人工加倍，在一個世代就可獲得純合的雙單倍體植株。對自花授粉作物普通小麥而言，運用常規(guī)育種程序，在不同親本材料雜交后，要獲得純合、遺傳穩(wěn)定的品種(系)至少需要6-7代。常規(guī)育種程序雖然在實踐中很實用，但周期長，使得研究者需要一種周期短的育種方法。雙單倍體方法對于滿足這種需要可能是一種經(jīng)濟有效的途徑。利用玉米花粉誘導小麥幼胚是產(chǎn)生小麥雙單倍體的方

2、法之一，雖然通過小麥×玉米已經(jīng)成功獲得了單倍體和雙單倍體小麥植株，但是，這項技術存在著小麥與玉米花期難以相遇、授粉時間及2，4-D濃度選擇不當導致得胚率低、培養(yǎng)基中激素濃度和胚大小影響胚的正常發(fā)育致使幼苗生長勢較弱以及人工加倍率不理想等問題。為了將此項技術應用于陜西楊凌，本研究于2003～2005對以上問題進行了研究，結(jié)果如下： 1.1月27日～2月7日室內(nèi)分4期點播糯玉米雜交種、甜糯雜交種、甜玉米雜交種及普通玉米雜交種，3月1

3、日移栽至大棚，從4月中旬開始便可獲得持續(xù)的、多類型玉米花粉。 2.小麥正常散粉前授粉的幼穗和散粉后授粉的幼穗，授粉后12h、36h分別用100mg/L、200mg/L和300mg/L的2，4-D蘸穗2次，散粉前授粉幼穗得胚率分別為6.74％、8.44％和6.61％；散粉后授粉幼穗的得胚率分別為2.53％、4.70％和2.67％。結(jié)果表明，小麥正常散粉前用200mg/L2，4-D處理得胚率最高。 3.選擇不同大小幼胚在1/

4、2MS+0.1％IAA+0.1％6-BAP+2％蔗糖+7.5％瓊脂(PH=5.8)的培養(yǎng)基上培養(yǎng)結(jié)果表明，470～510μm幼胚的培養(yǎng)效果最好，幼苗產(chǎn)生率為59.1％～61.9％。 4.以400-600μm的幼胚在1/2MS為主要成分的8種培養(yǎng)基上培養(yǎng)結(jié)果表明，1/2MS+0.2％IAA+0.2％6-BAP+2％蔗糖+7.5％瓊脂(PH=5.8)培養(yǎng)基的幼苗產(chǎn)生率平均為63.35％，高于其它7種培養(yǎng)基幼苗產(chǎn)生率(28.6％～57

5、.1％)。 5.用500mg/L秋水仙素加倍處理，做持續(xù)供氧和不供氧試驗，持續(xù)供氧的加倍率和加倍處理率為83.2％和68.8％，高于不供氧的70.9％和62.9％。 6.在持續(xù)供氧條件下，以250mg/L、500mg/L、750mg/L和1000mg/L的秋水仙素溶液進行染色體加倍處理，加倍率依次為51.7％、83.2％、84.1％和83.0％；加倍處理率依次為46.2％、68.8％、71.2％和70.9％。結(jié)果表明，持