四川省36個茶樹栽培品種親緣關(guān)系的RAPD分析.pdf

1、茶樹(Camelliasinensis(L.)O.Kuntze)是我國重要的經(jīng)濟作物之一，不僅栽培歷史悠久，而且分布廣泛。已有研究表明，我國西南部是茶樹的起源中心，孕育了豐富的茶樹種質(zhì)資源，其遺傳多樣性為世人矚目。目前，我國已在浙江杭州、云南勐海建成兩個國家級茶樹種質(zhì)資源圃，保存了3300多份茶樹種質(zhì)材料，如此豐富的資源為我們進行茶樹品種選育和生物技術(shù)研究提供了堅實的物質(zhì)基礎(chǔ)。近年來發(fā)展起來的RAPD標(biāo)記技術(shù)能夠直接從DNA水平反映材料

2、間的遺傳差異，方法簡便快捷，是研究生物遺傳多樣性的有力工具。 本實驗選用原產(chǎn)四川以及從福建、浙江、貴州、湖南、廣州、安徽、江蘇引進四川茶區(qū)的36份茶樹栽培品種為材料，探討適合本試驗供試材料基因組DNA提取的方法以及RAPD擴增反應(yīng)體系和程序，根據(jù)RAPD擴增圖譜，統(tǒng)計出所有二元數(shù)據(jù)，以此建立數(shù)據(jù)文件并統(tǒng)計出總帶數(shù)、共有帶數(shù)、特征帶，計算出多態(tài)性和供試茶樹品種間的遺傳距離，分析其遺傳多樣性，依據(jù)遺傳距離并結(jié)合類平均法(UPGMA)

3、，構(gòu)建茶樹品種間親緣關(guān)系的分子系統(tǒng)樹狀圖。另外，利用RAPD引物產(chǎn)生的特殊標(biāo)記和特殊的譜帶類型，進行茶樹栽培品種的分子鑒別。結(jié)果如下： 1、從50條隨機引物中篩選出擴增效果良好的16條，共擴增出167條譜帶，其中158條為多態(tài)性帶，占94.61％，平均每條引物擴增出的條帶為10.4條。最多的為15條，最少的也有7條。遺傳距離的變異范圍為0.149～0.679，平均為0.412。 2、對36份資源進行親緣關(guān)系的UPGMA聚

4、類分析，結(jié)果表明，當(dāng)以歐氏距離為0.385來劃分時，36份茶樹栽培品種聚為3個復(fù)合組和2個獨立組。第一類包括原產(chǎn)四川的蜀永307、早白尖5號、南江4號、名山白毫、名山早、蒙山9號、蒙山¨號、蒙山23號和原產(chǎn)貴州的黔湄419；第二類包括原產(chǎn)福建和浙江的福鼎大白茶、福選9號、福鼎大毫茶、梅占、政和、元宵茶、龍井43、龍井長葉、浙農(nóng)¨7、平陽特早、烏牛早、黃葉早、青峰、茂綠、碧云、迎霜、安吉白茶以及從福選9號變異的個體單株中選育出的名選213

5、；第三類包括原產(chǎn)湖南、廣東、安徽、江蘇的東湖早、櫧葉齊、英紅1號、英紅2號、鳧早2號、錫茶5號、錫茶11號。南江3號、黔湄502則游離在這3大類之外，分別單獨聚為一類。 3、利用16條RAPD引物擴增產(chǎn)生的40個特異標(biāo)記的存在和12個特異標(biāo)記的缺失，可以鑒定蜀永307、南江3號、名山白毫等共29份資源。引物S3擴增的27種譜帶類型中的24種特異譜帶類型可以鑒定南江3號、南江4號、名山白毫等共24份資源；引物S10擴增的21種譜帶